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- XK-SJH-A512
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
α-Glucosidase (α-GC) Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/48样
α-葡萄糖苷酶（α-Glucosidase, α-GC）试剂盒
微量法 100 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
α-GC(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖，不仅与细胞壁的松弛或加固有关，而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。测定原理：
α-GC 分解对-硝基ben-α-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基ben酚，后者在 400nm 有最大吸收峰， 通过测定吸光值升高速率来计算α-GC 活性。自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入 12mL 蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。粗酶液提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。2、加样表
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 试剂一 | 120 | |
| 蒸馏水 | 120 | |
| 试剂二 | 150 | 150 |
| 样本 | 30 | 30 |
| 上清液 | 70 | 70 |
| 试剂三 | 130 | 130 |
相关图片：
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
值。
- 按样本蛋白浓度计算：
α-GC 活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00585×V 反总]÷(V 样×Cpr)÷T
=56.98×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
- 按样本鲜重计算：
α-GC 活性(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00585×V 反总]÷(W×V 样÷V 样总)÷T
=56.98×(ΔA+0.0027) ÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
α-GC 活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.00585×V 反总]÷(500×V 样÷V 样总)÷T
=0.114×(ΔA +0.0027)
V 反总：反应体系总体积，0.3mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.03mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g； 500：细胞或细菌总数，500 万；T：反应时间，30min。
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
值。
- 按样本蛋白浓度计算：
α-GC 活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027) ÷0.0039×V 反总]÷(V 样×Cpr)÷T
=85.47×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
- 按样本鲜重计算：
α-GC 活性(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.0039×V 反总]÷(W×V 样÷V 样总)÷T
=85.47×(ΔA+0.0027) ÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
α-GC 活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.0039×V 反总]÷(500×V 样÷V 样总)÷T
=0.171×(ΔA +0.0027)
V 反总：反应体系总体积，0.3mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.03mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g； 500：细胞或细菌总数，500 万；T：反应时间，30min。
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