- ￥516 - 6574
- 博尔森/BIOESN
- BES22094KB
- 中国
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
Sephadex G-100
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
25g /100g /500g
| 规格： | 25g | 产品价格： | ￥516.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100g | 产品价格： | ￥1634.0 |
| 规格： | 500g | 产品价格： | ￥6574.0 |
葡聚糖凝胶 G 系列使用说明 葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。亲水基 质使其非特异性吸附最小化，并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G 型的葡聚糖凝胶有各种 不同的交联度， 因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因 盐和洗涤剂的存在而受影响。
2 产品说明
3 使用方法
Sephadex 系列产品以干粉形式存在，使用前必须溶胀，在膨胀期间应避免过度搅拌，因
为它可能破坏填料，不要使用磁力搅拌器。
3.1 填料的准备
（1） 将填料在过量去离子水或缓冲液中，室温条件下膨胀 24 小时，或用热水膨胀 1 小
时。洗脱缓冲液不应含有高粘度的试剂。溶胀过程中，如果上层有漂浮物，请去除。
（2） 将溶胀好的填料，所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度，对所有的缓冲液进行脱气处理。
3.2 装柱
（1） 检查层析柱所有部件，特别是过滤网，密封圈，螺旋塞是否紧密，玻璃管是否干净和完整。
（2） 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位，务必使底端无气泡。
（3） 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，
使凝胶 在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
（4）打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过，使柱床稳定（注意压力不要超过填 料最大耐压）。
3.3 平衡
上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止（流出液的 pH 值和电导值等于
上柱的 Buffer 的 pH 值和电导值）。
3.4上样
样品一定要离心或过滤后（0.45um 滤膜）上样。
凝胶过滤的上样量一般为不大于 5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在 1-2%的柱床体积，视分
离情况可以调整；脱盐时上样量可以达到 20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱子越高，分离效果相应越好，但是，柱高过高的凝胶柱会引起较大的反压，也应当尽可能避免。难分离物质要有一定 柱高和流速控制，脱盐时高径比为 5：1 即可。
3.5 洗脱方法
可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱。
3.6 在位清洗（CIP）
凝胶使用十次后作一次 CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是用 0.1 M 洗 2 个柱体积，再以至少 10 个柱体积平衡缓冲液再生。
4 保存
未处理的填料，室温密闭保存。使用完的填料，用纯水将盐分彻底冲洗，最后保存在 20%乙醇中，4℃ 保存。
5 注意事项：
（1）上样之前，样品必须经过膜过滤及去除色素，否则杂质及色素会被吸附到填料上，影响填料的 正常使用。所有的缓冲液均需要用 0.45um 的过滤器过滤。
（2）在使用过程中，避免使用高浓度的强酸强碱，酸和碱的浓度应低于 0.1 摩尔。碱会使流速变慢。
（3）不同的样品，吸附和洗脱方法不相同，可以根据相关的文献进行。
6 不同规格特性
细颗粒：流速慢，分离效果。
粗颗粒：流速快，分离效果偏差。
中颗粒：流速适中，分离效果适中，一般客户最常选用此型号。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验。分子量大于允许进入凝胶网孔范围的物质完全被凝胶排阻，不能进入凝胶颗粒内部，阻滞作用小，随着溶剂在凝胶颗粒之间流动，因此流程短，而先流出层析柱；分子量小的物质可完全进入凝胶颗粒的网孔内，阻滞作用大，流程延长，而最后从层析柱中流出。若被分离物的分子量介于完全排阻和完全进入网孔物质的分子量之间，则在两者之间从柱中流出，由此就可以达到分离目的。 本实验以葡聚糖凝胶G—25作为固定相载体，来分离蓝色葡聚糖—2000和溴酚蓝。蓝色葡聚糖—2000分子量接近2×10 6 ， 而溴酚
蛋白 图4.4 Ve / V0对log MW作图 试剂和器材 一、试剂洗脱液：0.05M Tris-HCl缓冲液(pH7.5)，0.1M KCl溶液：称取12.12g Tris，15g KCl，先用少量去离子水溶解，再加入6.67mL浓HCl，用去离子水定容至2L。 蓝色葡聚糖2000；Sephsdex G-100；N-乙酰酪氨酸乙酯饱和溶液(以洗脱液饱和)。 二、材料 牛血清白蛋白(Mr 67 000)；卵清蛋白(Mr 43 000
7.5±0.5 24 3 3.92～15.86 sephadex g-100
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