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北京吉瑞森&南通海箬化学
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17070901 DEAE SEPHAROSE FAST FLOW 500ml
DEAE Sepharose FF阴离子交换层析树脂
北京吉瑞森&南通海箬化学
DEAE Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析树脂
DEAE Sepharose Fast Flow 是一种用于快速蛋白质纯化的弱阴离子交换层析树脂。
DEAE Sepharose FF阴离子交换层析树脂
为工业下游过程开发的经过充分验证的弱阴离子交换剂。
广泛用于各种批准的生物药物的捕获和中间纯化。
高化学稳定性允许经过充分验证的 CIP 和消毒协议。
亲水性基础基质确保洗脱池中非特异性结合水平低,宿主细胞来源的杂质水平低。
满足工业对供应安全、稳健性能和监管支持的需求。
简化的放大
这种树脂是 Sepharose Fast Flow 离子交换平台的一部分,该平台已在工业下游加工中得到广泛应用。该树脂由具有二乙氨基乙基 (DEAE) 弱阴离子交换基团的交联 6% 琼脂糖珠组成,具有高度的化学稳定性,可实现久经考验的原位清洗 (CIP) 和消毒方案。
高度交联的琼脂糖树脂可实现高流速和高生产率。使用这种树脂进行放大很简单,并得到一系列预装工艺开发工具的进一步帮助,例如 PreDictor 96 孔板、PreDictor RoboColumns™ 和 HiTrap 柱。
成功使用——研究规模
DEAE Sepharose Fast Flow 树脂用于各种研究应用,包括:
从豚鼠中性粒细胞中分离 PI 3-激酶
鸡平滑肌肌球蛋白磷酸酶的纯化
兼容的空柱——研究规模
解决方案包括用于研究规模的各种空柱。这种 DEAE 树脂与其中两条产品线 Tricorn 和 XK 色谱柱兼容。
兼容的空柱 – 生物工艺规模
对于这种 DEAE 树脂的工艺规模应用,推荐使用 AxiChrom 色谱柱。 DEAE Sepharose Fast Flow 也可以装入其他色谱柱,例如 BPG 和 Chromaflow。
预装柱——研究规模
这种弱阴离子交换树脂有以下几种形式:
HiScreen DEAE FF 用于放大和工艺开发
HiPrep DEAE FF 色谱柱便于放大
预装柱 – 生物工艺规模
可应要求提供用于生物过程应用的预装 ReadyToProcess 色谱柱。
17070910DEAE Sepharose Fast Flow, 25 mL
17070901DEAE Sepharose Fast Flow, 500 mL
| Parameter | DEAE Sepharose Fast Flow, 500 mL |
|---|---|
| BioProcess resin | Yes |
| Ligand | Diethylaminoethyl |
| Particle size, d50V1 | ~90 µm |
| Ion Exchanger Type | Weak anion exchanger |
| Matrix | cross-linked agarose, 6%, spherical |
| Ionic Capacity | 0.12–0.15 mmol (Cl-)/mL resin |
| pH stability, operational2 | 2–12 |
| pH stability, CIP3 | 2–14 |
| pH ligand fully charged4 | Below 9 |
| Pressure/Flow Specification | 300-600 cm/h, 100 kPa, XK 50/30 column, bed height 15 cm |
| Exclusion limit (Mr) (globular proteins) | ~4 × 10⁶ |
| Storage | 4 to 30°C, 20% Ethanol |
| Chemical stability5 | Stable to commonly used aqueous buffers:1.0 M NaOH, 8 M urea, 8 M guanidine hydrochloride, 70% ethanol |
| Certificate of Analysis | Yes |
| Pack size | 500 mL |
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文献和实验处理后才可以使用。再生处理可先用高浓度NaCl (1-2 mol/L)过柱冲洗柱床,以除去DEAE-52阴离子交换纤维所吸附的成份。然后,再用0.5 mol/L的HCl和NaOH处理,处理方法与预处理完全相同。 DEAE-纤维素的处理及装柱 (1)处理 本实验采用的是DEAE-纤维素DE 52 是弱酸型阴离子交换剂,具体处理方法为:先将DE52阴离子交换剂干粉浸泡于蒸馏水中,去除杂质;再在0.5N的HCL溶液中浸泡1-2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH
。 离子交换层析中的固定相称为离子交换剂。它是由在不溶性高分子母体上引入不同的可解离基团所构成。常用的不溶性高分子母体有纤维素、葡聚糖、琼脂 糖及人工合成的树脂等。引入于母体上的活性基团主要有酸性或碱性物质。由于引入的酸性物质可解离出H+离子,能与液相中的阳离子交换,故这类离子交换剂称为阳离子交换剂;引入的碱性物质可解离出OH-离子,能与液相中的阴离子交换,故将这类离子交换剂称为阴离子交换剂。 由于引入的酸或碱的强弱不同,两类离子交换剂又分为不同的型。 酸类物质以磺酸基(-SO3
上,然后再分别洗脱下来获得纯品,或者把不需要的成分吸附于离子交换剂上,需要的成分直接流出,得到纯品。本实验采用DEAE-纤维素层析柱纯化血清IgG,利用pH6.7的缓冲液溶解样品IgG,此时IgG粗物中除IgG外,其他杂蛋白均带上不同数量的负电荷,可以和DEAE上的阴离子发生交换吸附于柱上。IgG因不解离带电,而不发生交换吸附,利用此特点,让溶解后的样品流过DEAE纤维素柱,即可直接收集到较纯的IgG。(二)试剂及器材 (1)DEAE-纤维素的活化:称取1g DEAE32或52,放入5ml量筒中,加蒸馏
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