- ￥430
- Xkbio
- XK-SJH-A114
- 国产
- 2026年03月03日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
NADH oxidase (NOX) test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：
NOX（EC 1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将 NADH 氧化为 NAD。该酶不仅参与 NAD 的再生，而且与免疫反应密切相关。测定原理：
NOX 能够将NADH 氧化为 NAD，NADH 的氧化与 2,6 二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联， 蓝色的 DCPIP 被还原为无色的 DCPIP，在 600nm 下测定蓝色DCPIP 的还原速率计算出NADH 氧化酶活性的大小。需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水试剂的组成和配制：
试剂一：液体 50mL×1 瓶，-20℃保存。试剂二：液体 10mL×1 瓶，-20℃保存。试剂三：液体 1mL×1 瓶，-20℃保存。试剂四：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。试剂五：液体 6 mL×1 瓶，4℃保存。试剂六：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 5mL 蒸馏水；用不完的试剂分装后-20℃ 保存，禁止反复冻融。
样本的前处理：
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：① 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆 600g，4℃离心 5min。
③ 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心 10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄漏的NOX（此步可选做）。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体，加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴， 功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10 秒，重复 30 次），用于 NOX 活性测定。
血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 600nm，蒸馏水调零。2、 样本测定
- 试剂四、试剂五和试剂六于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）孵育 5min。
- 在 1mL 石英比色皿中加入 40μL 样本、700μL 试剂四、100μL 试剂五和 160μL 试剂六，混匀，记录 600nm 处 20s 时吸光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2，计算 ΔA=A1-A2。
NOX 活力单位的计算
1、血清（浆）NOX 活力的计算:
单位的定义：每 mL 血清（浆）在每 mL 反应体系中每分钟 A600 变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
NOX（U/mL）＝ΔA×V 反总÷V 样÷0.01÷T=2500×ΔA
2、组织、细菌或细胞中 NOX 活力的计算:
- 按样本蛋白浓度计算：
NOX（U/mg prot）=ΔA×V 反总÷（V 样×Cpr）÷0.01÷T=2500×ΔA÷Cpr 此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
- 按样本鲜重计算：
NOX（U/g 鲜重）=ΔA×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.01÷T=505×ΔA÷W
- 按细菌或细胞密度计算：
NOX（U/104 cell）=ΔA×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.01÷T=1.01×ΔA
V 反总：反应体系总体积，1mL； V 样：加入样本体积，0.04mL；V 样总：加入提取液体积，0.202 mL；T：反应时间，1 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量；500： 细胞或细菌总数，500 万。
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文献和实验人 线粒体NADH 氧化酶酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本 中 线粒体NADH 氧化酶 的 活性。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 线粒体 NADH 氧化酶 水平。用纯化的人 线粒体 NADH 氧化酶 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 线粒体 NADH 氧化酶 ，再与 HRP 标记的 线粒体
于该检测试剂盒对目标修饰的特异性） 测定广泛物种（包括哺乳动物细胞/组织、植物和细菌）的去甲基化酶活性 具有简单比色或荧光读数的快速微孔板版本 3 小时内即可提供数据 表征组蛋白乙酰化通路 提供可分析总体活性以及 H4 特异性的 HAT 活性的试剂盒。这些检测试剂盒可以检测 HAT 催化乙酰基从乙酰辅酶 a 供体转移到组蛋白肽的过程，该过程会生成乙酰化肽和 CoA-SH。然后通过 比色法或荧光法测定 CoA-SH 副产物： 比色法 - CoA-SH 作为生成 NADH
质子泵 proton pump 存在于生物膜，是一种逆着膜两侧H 的电化学势差（△μH ）而主动地运输H 的膜蛋白。狭义地是指分解ATP而运输H ，或利用H 流出的能量而合成ATP的H ATPase， H ATPase存在于线粒体及叶绿体中，为活体取得能量的主要手段。广义地也包括将光能直接转变成运输质子能量的细菌视紫红质，以及通过电子传递的能量运输质子的细胞色素C氧化酶和NADH－NADP转氢酶等。
