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N
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无锡云萃生物
- CAS号：
78628-80-5
- 规格：
1kg/2kg/3kg/4kg
| 规格： | 1kg | 产品价格： | ￥100.0 |
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文献和实验1. 使用正确的细胞或组织储存条件在样品用液氮瞬间冻结之后，应该储存在-80℃，千万不能解冻。即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻，也会导致RNA的降解和损失。瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉，然后置于裂解液中进行匀浆。RNAfixer使样品储存更为便利。储存在RNAfixer中的细胞或组织可在室温下稳定保存长达1个星期，在4℃可稳定保存长达1个月，或永久保存在-20℃。2. 消除环境RNase的污染为了得到完整的、高品质RNA,在整个RNA制备过程中，当RNA离开强
液分装到RNase-free的50ml无菌离心管中,冰浴5分钟. 将组织样品放入变性裂解液中,在高速下匀浆15-30秒/次,直到看不见组织和细胞碎片. 根据表1加入适量2M的乙酸钠(pH4.0),反复颠倒混匀4-5次. 根据表1加入适量酚/氯仿,加盖颠倒混合4-5次,再摇动10秒钟. 冰浴10分钟. 4C,12000g离心20分钟. 小心转移上层水相于另一个RNase-free的无菌离心管中,内含所需
，蛋白酶K(10mg/ml)代替蛋白酶重复2-4步骤。测定含量。 d) 样品RNA的分离，纯化 含106个细胞液加等量纯化溶液[4mol/L胍基硫氰酸盐，25mmol/L柠檬酸pH7.0，0.5％肌氨酸（sarcosyl），0.1mol/L 2-巯基乙醇]。总体积为细胞沉淀4-5倍，混匀。加0.1体积2ml/L乙酸钠（pH4.1），1体积酚（重蒸水上封），0.2体积CIAA，混匀器剧烈混合10秒钟。冰水浴15分钟
