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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
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- 英文名:
7-Bromo-5-methyl-1H-indazole
- 库存:
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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
885272-97-9
- 规格:
2mg/10mg/500mg/591g
| 规格: | 2mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 591g | 产品价格: | ¥191.0 |
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文献和实验未泳动出凝胶管,样品就没有走出胶管的危险。 在不连续系统中,当接通电源开始电泳时,系统中的甘氨酸、蛋白质、HCl中的氯离子和溴酚蓝等均解离为阴离子,形成离子流向阳极泳动。其迁移率取决于离子的电荷数、分子 量大小及形状。然而,当电极缓冲液(pH8.3)中的甘氨酸离子在进入浓缩胶时,它们遇到了比pH8.3低的pH(6.7),pH下降了近两个单位,几乎接近于甘氨酸的等电点(5.97),于是甘氨酸的解离度突然降低,所带电荷量明显减少,迁移率减慢。血清样品中个蛋白质成分也进入浓缩胶,pH
为初涉PCR的新手们准备了一道好菜,希望能使你们快速入门:)
;温度高特异性强,但过高则引物不能与模板牢固结合,DNA扩增效率下降;温度低产量高,但过低可造成引物与模板错配,非特异性产物增加。一般先由37℃反应条件开始,设置一系列对照反应,以确定某一特定反应的最适退火温度。也可根据引物的(G+C)%含量进行推测,把握试验的起始点,一般试验中退火温度Ta(annealing temperature)比扩增引物的融解温度TTm(melting temperature)低5℃,可按公式进行计算:Ta = Tm - 5℃= 4(G+C)+ 2(A+T) -5℃
) -5℃ 其中A,T,G,C分别表示相应碱基的个数。例如,20个碱基的引物,如果(G+C)%含量为50%时,则Ta的起点可设在55℃。在典型的引物浓度时(如0.2μmol/L),退火反应数秒即可完成,长时间退火没有必要。 3.引物延伸温度温度的选择取决于Taq DNA聚合酶的最适温度。一般取70~75℃,在72℃时酶催化核苷酸的标准速率可达35~100个核苷酸/秒。每分钟可延伸1kb的长度,其速度取决于缓冲溶液的组成、pH值、盐浓度与DNA模板的性质。扩增片段如短于150bp,则可省略延伸这一步










