CryoCell细胞冻存袋-5mL

做细胞冻存的人都经历过这些致命败笔！你逃过了吗？

在园子里经常看到询问冻存、复苏细胞的方法和注意事项。故介绍一些致命的 “败笔”，和解决方法。 希望对大家有帮助。 （ 以 Raji 为例） 一、细胞冻存： 1. 错误的时机： 细胞状态不好（长的太过了，培养液已经很黄；细胞可疑污染；细胞已 经开始凋亡或崩解；连续培养超过二个月，细胞性状已有改变改变）。 解决： 最佳时机：细胞增殖旺盛，情况稳定，试验效果良好，复苏后两周内。 2. 细胞太少： 冻存时细胞浓度低于 1-5×1000,000/ml。（复苏很难成功）。 解决： 离心后调整细胞

细胞冻存和复苏标准操作规程(SOP)

2. 小牛血清 3. 培养液 4. 双抗（青霉素、链霉素） 5. 胰蛋白酶（0.08%） 6. 1NHCl 7. 7.4%NaHCO3 8. DMSO（分析纯）或无色新鲜甘油二、操作步骤（一）细胞冻存 1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液； 2. 取对数生长期的细胞，用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来，悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离心管中、； 3. 离心1000rpm，5min

大鼠间充质干细胞培养

-7500个细胞/cm2接种细胞于T25的培养瓶中。 3. 每个培养瓶中加完全培养液（RM-001）3-5ml，后置于37℃、5%CO2 培养箱内培养。 五、细胞冻存 1. 调整细胞数5×105 /ml，加入一定量的基础培养液（RM-001B)。之后，配制等量的冷冻保护剂。 2. 冷冻保护剂的配制：FBS占80％，DMSO占20％ 3. 将细胞悬液于冰浴中，慢慢逐滴加入冷冻保护剂，边滴加边摇动，加完后用轻轻吹打混匀。 4. 在冰浴中，将细胞分装于冻存管中