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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
NM_001308090.1;HD7;HD7A;HDAC7A
- 保质期：
5年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
基本信息
名称：pENTR223-HDAC7人源基因质粒
别称: NM_001308090.1;HD7;HD7A;HDAC7A
复制子: pUC
原核抗性: Spe
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Spe
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pDONR223-HDAC7（NM_001308090.1）是一个人源基因克隆质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3620 bp ds-DNA circular SYN 05-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3620
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 268..295
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 387..473
/gene="Escherichia coli rrnB"
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
protein_bind 570..668
/gene="mutant version of attL"
/label=attL1
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
misc_feature 669..1498
/label=HADC7
/note="NM_001308090.1"
protein_bind complement(1499..1597)
/gene="mutant version of attL"
/label=attL2
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
CDS 2086..2877
/codon_start=1
/gene="aadA"
/product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy,
1985)"
/label=Spe
/note="confers resistance to spectinomycin and
streptomycin"
/translation="MREAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF
EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
rep_origin 2970..3558
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga
61 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga
121 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
181 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaata cgcgtaccgc
241 tagccaggaa gagtttgtag aaacgcaaaa aggccatccg tcaggatggc cttctgctta
301 gtttgatgcc tggcagttta tggcgggcgt cctgcccgcc accctccggg ccgttgcttc
361 acaacgttca aatccgctcc cggcggattt gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa
421 caacagataa aacgaaaggc ccagtcttcc gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg
481 gcagttccct actctcgcgt taacgctagc atggatgttt tcccagtcac gacgttgtaa
541 aacgacggcc agtcttaagc tcgggccccc aaataatgat tttattttga ctgatagtga
601 cctgttcgtt gcaacaaatt gatgagcaat gcttttttat aatgccaact ttgtacaaaa
661 aagttggcat gggcttctgc ttcttcaact cagtggccat cgcctgccgg cagctgcaac
721 agcagagcaa ggccagcaag atcctcattg tagactggga cgtgcaccat ggcaacggca
781 cccagcaaac cttctaccaa gaccccagtg tgctctacat ctccctgcat cgccatgacg
841 acggcaactt cttcccgggg agtggggctg tggatgaggt aggggctggc agcggtgagg
901 gcttcaatgt caatgtggcc tgggctggag gtctggaccc ccccatgggg gatcctgagt
961 acctggctgc tttcaggata gtcgtgatgc ccatcgcccg agagttctct ccagacctag
1021 tcctggtgtc tgctggattt gatgctgctg agggtcaccc ggccccactg ggtggctacc
1081 atgtttctgc caaatgtttt ggatacatga cgcagcaact gatgaacctg gcaggaggcg
1141 cagtggtgct ggccttggag ggtggccatg acctcacagc catctgtgac gcctctgagg
1201 cctgtgtggc tgctcttctg ggtaacaggg tggatcccct ttcagaagaa ggctggaaac
1261 agaaacccaa cctcaatgcc atccgctctc tggaggccgt gatccgggtg cacagtaaat
1321 actggggctg catgcagcgc ctggcctcct gtccagactc ctgggtgcct agagtgccag
1381 gggctgacaa agaagaagtg gaggcagtga ccgcactggc gtccctctct gtgggcatcc
1441 tggctgaaga taggccctcg gagcagctgg tggaggagga agaacctatg aatctctacc
1501 caactttctt gtacaaagtt ggcattataa gaaagcattg cttatcaatt tgttgcaacg
1561 aacaggtcac tatcagtcaa aataaaatca ttatttggcc atccagctga tatcccctat
1621 agtgagtcgt attacatggt catagctgtt tcctggcagc tctggcccgt gtctcaaaat
1681 ctctgatgtt acattgcaca agataaaaat atatcatcat gcctcctcta gaccagccag
1741 gacagaaatg cctcgacttc gctgctgccc aaggttgccg ggtgacgcac accgtggaaa
1801 cggatgaagg cacgaaccca gtggacataa gcctgttcgg ttcgtaagct gtaatgcaag
1861 tagcgtatgc gctcacgcaa ctggtccaga accttgaccg aacgcagcgg tggtaacggc
1921 gcagtggcgg ttttcatggc ttgttatgac tgtttttttg gggtacagtc tatgcctcgg
1981 gcatccaagc agcaagcgcg ttacgccgtg ggtcgatgtt tgatgttatg gagcagcaac
2041 gatgttacgc agcagggcag tcgccctaaa acaaagttaa acatcatgag ggaagcggtg
2101 atcgccgaag tatcgactca actatcagag gtagttggcg tcatcgagcg ccatctcgaa
2161 ccgacgttgc tggccgtaca tttgtacggc tccgcagtgg atggcggcct gaagccacac
2221 agtgatattg atttgctggt tacggtgacc gtaaggcttg atgaaacaac gcggcgagct
2281 ttgatcaacg accttttgga aacttcggct tcccctggag agagcgagat tctccgcgct
2341 gtagaagtca ccattgttgt gcacgacgac atcattccgt ggcgttatcc agctaagcgc
2401 gaactgcaat ttggagaatg gcagcgcaat gacattcttg caggtatctt cgagccagcc
2461 acgatcgaca ttgatctggc tatcttgctg acaaaagcaa gagaacatag cgttgccttg
2521 gtaggtccag cggcggagga actctttgat ccggttcctg aacaggatct atttgaggcg
2581 ctaaatgaaa ccttaacgct atggaactcg ccgcccgact gggctggcga tgagcgaaat
2641 gtagtgctta cgttgtcccg catttggtac agcgcagtaa ccggcaaaat cgcgccgaag
2701 gatgtcgctg ccgactgggc aatggagcgc ctgccggccc agtatcagcc cgtcatactt
2761 gaagctagac aggcttatct tggacaagaa gaagatcgct tggcctcgcg cgcagatcag
2821 ttggaagaat ttgtccacta cgtgaaaggc gagatcacca aggtagtcgg caaataaccc
2881 tcgagccacc catgaccaaa atcccttaac gtgagttacg cgtcgttcca ctgagcgtca
2941 gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc
3001 tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta
3061 ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt
3121 ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc
3181 gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg
3241 ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg
3301 tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag
3361 cattgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc
3421 agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat
3481 agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg
3541 gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc
3601 tggccttttg ctcacatgtt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
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名称：pENTR223-HDAC7人源基因质粒
别称: NM_001308090.1;HD7;HD7A;HDAC7A
复制子: pUC
原核抗性: Spe
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Spe
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pDONR223-HDAC7（NM_001308090.1）是一个人源基因克隆质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3620 bp ds-DNA circular SYN 05-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3620
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 268..295
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 387..473
/gene="Escherichia coli rrnB"
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
protein_bind 570..668
/gene="mutant version of attL"
/label=attL1
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
misc_feature 669..1498
/label=HADC7
/note="NM_001308090.1"
protein_bind complement(1499..1597)
/gene="mutant version of attL"
/label=attL2
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
CDS 2086..2877
/codon_start=1
/gene="aadA"
/product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy,
1985)"
/label=Spe
/note="confers resistance to spectinomycin and
streptomycin"
/translation="MREAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
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EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
rep_origin 2970..3558
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga
61 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga
121 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
181 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaata cgcgtaccgc
241 tagccaggaa gagtttgtag aaacgcaaaa aggccatccg tcaggatggc cttctgctta
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361 acaacgttca aatccgctcc cggcggattt gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa
421 caacagataa aacgaaaggc ccagtcttcc gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg
481 gcagttccct actctcgcgt taacgctagc atggatgttt tcccagtcac gacgttgtaa
541 aacgacggcc agtcttaagc tcgggccccc aaataatgat tttattttga ctgatagtga
601 cctgttcgtt gcaacaaatt gatgagcaat gcttttttat aatgccaact ttgtacaaaa
661 aagttggcat gggcttctgc ttcttcaact cagtggccat cgcctgccgg cagctgcaac
721 agcagagcaa ggccagcaag atcctcattg tagactggga cgtgcaccat ggcaacggca
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2101 atcgccgaag tatcgactca actatcagag gtagttggcg tcatcgagcg ccatctcgaa
2161 ccgacgttgc tggccgtaca tttgtacggc tccgcagtgg atggcggcct gaagccacac
2221 agtgatattg atttgctggt tacggtgacc gtaaggcttg atgaaacaac gcggcgagct
2281 ttgatcaacg accttttgga aacttcggct tcccctggag agagcgagat tctccgcgct
2341 gtagaagtca ccattgttgt gcacgacgac atcattccgt ggcgttatcc agctaagcgc
2401 gaactgcaat ttggagaatg gcagcgcaat gacattcttg caggtatctt cgagccagcc
2461 acgatcgaca ttgatctggc tatcttgctg acaaaagcaa gagaacatag cgttgccttg
2521 gtaggtccag cggcggagga actctttgat ccggttcctg aacaggatct atttgaggcg
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2641 gtagtgctta cgttgtcccg catttggtac agcgcagtaa ccggcaaaat cgcgccgaag
2701 gatgtcgctg ccgactgggc aatggagcgc ctgccggccc agtatcagcc cgtcatactt
2761 gaagctagac aggcttatct tggacaagaa gaagatcgct tggcctcgcg cgcagatcag
2821 ttggaagaat ttgtccacta cgtgaaaggc gagatcacca aggtagtcgg caaataaccc
2881 tcgagccacc catgaccaaa atcccttaac gtgagttacg cgtcgttcca ctgagcgtca
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3361 cattgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc
3421 agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat
3481 agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg
3541 gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc
3601 tggccttttg ctcacatgtt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
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二、转化图片
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文献和实验相关实验
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，你可以很容易地将RNAi框转移到BLOCK-iT? RNAi慢病毒和腺病毒载体。 图8 创建带有RNAi框的哺乳动物表达载体 dsDNA寡核苷酸退火，在室温下与线性的pENTR™/U6载体共同孵育5分钟，混合物转化One Shot® TOP10 Competent E. coli.感受态细胞。获得的质粒可以直接用来进行瞬时转染，来自U6启动子的shRNA形成一个发夹结构，然后被加工成siRNA分子。然后被加工成siRNA分子。 在各种哺乳动物细胞中有效的转染和长期的shRNA表达 你将可以使
，nucleotide)才能特异性地阻断dsRNA，同时他们还发现了体内一个分解dsRNA为siRNA的叫Dicer的酶(Agami2002)。近几年来RNAi的研究取得了很大进展，他被《Science》杂志评为2001年的十大科学成就之一。2002年RNAi的研究又有了新的突破，发现他在基因表达调控中发挥重要作用，他也名列2002年《Science》杂志评的十大科学成就之首。? 1 RNAi生物学意义 转座因子和病毒等外源核酸的引入能破坏宿主细胞基因组的稳定性。转录后基因沉默，就是宿主将外源基因视为
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pENTR223-HDAC7人源基因质粒
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