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Quantum Design中国
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外泌体检测
仅需少量样品即可一次完成外泌体计数、粒径、蛋白表达、蛋白共定位、亚群分布的分析!
检测样本类型:对细胞培养上清、血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液等生物样本中的外泌体直接进行分析。
捕获抗体种类:anti-CD81, anti-CD9, anti-CD63, 同型IgG对照;可自定义
单次上样体积:35 µl稀释样本
重复检测数目:3复孔
荧光抗体种类:CD9(Blue)/ CD81(Green)/ CD63(Red)
实验原理
① 35 μL外泌体样品滴加在芯片上孵育;
② 预先包被的抗体特异结合外泌体表面蛋白以捕获外泌体;
③ 再使用荧光抗体特异性标记需要表征的标记物;
④ 后用ExoView R100检测外泌体粒径、计数、蛋白表达(CD9,CD81,CD63等)及共定位。
检测流程

产品类别
| 产品货号 | 产品名称 |
| EV-TETRA-C | 人外泌体检测试剂盒 |
| EV-TETRA-P | 人血浆外泌体检测试剂盒 |
| EV-TETRA-M2 | 鼠外泌体检测试剂盒 |
| EV-TETRA-C-CAR | 人外泌体内容物检测试剂盒 |
| EV-TETRA-P-CAR | 人血浆外泌体内容物检测试剂盒 |
| EV-TC-FLEX | 自由捕获人外泌体检测试剂盒 |
| EV-TP-FLEX | 自由捕获人血浆外泌体检测试剂盒 |
| EV-TC-FLEX-CAR | 自由捕获人外泌体内容物检测试剂盒 |
| EV-TP-FLEX-CAR | 自由捕获人血浆外泌体内容物检测试剂盒 |
| EV-TM-FLEX | 自由捕获鼠外泌体检测试剂盒 |
| EV-TM-FLEX-CAR | 自由捕获鼠外泌体内容物检测试剂盒 |
| EV-FLEX-2 | 自由捕获外泌体检测试剂盒 |
| EV-FLEX-2 -CAR | 自由捕获外泌体内容物检测试剂盒 |
| EV-CTETRA-1/2/3 | 人外泌体检测试剂盒+1/2/3个自定义捕获抗体 |
| EV-CTETRA-1/2/3-CAR | 人外泌体内容物检测试剂盒+1/2/3个自定义捕获抗体 |
| EV-CUST-1/2/3/4/5/6 | 自定义1/2/3/4/5/6抗体捕获外泌体检测试剂盒 |
| EV-CUST-1/2/3/4/5/6-CAR | 自定义1/2/3/4/5/6抗体捕获外泌体内容物检测试剂盒 |
试剂盒特点
| 特异性捕获 芯片上可包被多达6种捕获抗体,特异性捕获含特定蛋白标记物的外泌体。
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| 对阳性外泌体计数 芯片捕获外泌体后,可通过SP-IRIS技术直接检测样品中外泌体的数量。
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| 单个外泌体蛋白共定位分析 检测每个外泌体的荧光信号并进行统计,可获得荧光共定位信息,用于分析样品中不同表型外泌体的比例(如右图所示)。
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| 无需纯化 使用抗体捕获模式,防止样品中杂质影响结果,可直接检测血液、尿液和细胞培养液中的外泌体,未纯化样品的测量结果与纯化后基本一致(如右图所示)。
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| 粒径分辨率高 高精度SP-IRIS技术,可检测≥50 nm的外泌体,测量结果与电子显微镜检测结果基本一致,并统计生成外泌体的粒径分布结果(如右图所示)。
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| 可检测外泌体内容物 试剂盒配套相应的穿膜剂,可穿透外泌体并对外泌体内容物进行染色并检测,未穿膜时只能检测到跨膜蛋白CD9的荧光信号,穿膜后即可检测到外泌体内容物Syntenin的表达(如右图所示)。
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DEMO报告
外泌体荧光数量统计

外泌体粒径检测

荧光强度与粒径关系

荧光共定位分析

发表文章
• Andras Saftics.(2021) Data evaluation for surface-sensitive label-free methods to obtain real-time kinetic and structural information of thin films: A practical review with related software packages. Advances in Colloid and Interface Science.
• Kyoung-Won Ko.(2021) Integrated Bioactive Scaffold with Polydeoxyribonucleotide and Stem-Cell-Derived Extracellular Vesicles for Kidney Regeneration. ACS Nano.
• Tanina Arab. (2021) Characterization of extracellular vesicles and synthetic nanoparticles with four orthogonal single‐particle analysis platforms. Journal of Extracellular Vesicles.
• Niaz Z.Khan.(2021) Spinal cord injury alters microRNA and CD81+ exosome levels in plasma extracellular nanoparticles with neuroinflammatory potential. Brain, Behavior, and Immunity.
• Dario Brambilla. (2021) EV Separation: Release of Intact Extracellular Vesicles Immunocaptured on Magnetic Particles. Analytical Chemistry.
• Enkhtuya Radna. (2021) Extracellular vesicle mediated feto-maternal HMGB1 signaling induces preterm birth. Lab on a Chip.
• Li, M., Soder. (2021) WJMSC‐derived small extracellular vesicle enhance T cell suppression through PD‐L1. Journal of Extracellular Vesicles.
• Crescitelli, R. (2021) Isolation and characterization of extracellular vesicle subpopulations from tissues. Nature protocols.
• Berger, A. (2021). Local administration of stem cell-derived extracellular vesicles in a thermoresponsive hydrogel promotes a pro-healing effect in a rat model of colo-cutaneous post-surgical fistula. Nanoscale.
• Vidal, M. (2020) Exosomes and GPI-anchored proteins: Judicious pairs for investigating biomarkers from body fluids. Advanced drug delivery reviews.
• K Cho, H Kook.(2020)Study of immune-tolerized cell lines and extracellular vesicles inductive environment promoting continuous expression and secretion of HLA-G from semiallograft immune tolerance during pregnancy. Journal of Extracellular Vesicles.
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• Annette M. Marleau.(2020)Targeting tumor-derived exosomes using a lectin affinity hemofiltration device. Cancer Research.
• Alessandro Gori.(2020)Membrane-Binding Peptides for Extracellular Vesicles On-Chip Analysis. Journal of Extracellular Vesicles.
• Rossella Crescitelli.(2020)Subpopulations of extracellular vesicles from human metastatic melanoma tissue identified by quantitative proteomics after optimized isolation. Journal of Extracellular Vesicles.
• Maria S. Panagopoulou.(2020) Phenotypic analysis of extracellular vesicles: a review on the applications of fluorescence. Journal of Extracellular Vesicles.
• WeiYan.(2020) Immune Cell-Derived Exosomes in the Cancer-Immunity Cycle. Trends in Cancer.
• Daniel Bachurski. (2019) Small RNA Sequencing across Diverse Biofluids Identifies Optimal Methods for exRNA Isolation. Cell.
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文献和实验, Colloids and Surfaces A: Physicochem. Eng. Aspects 387,2011, 35– 42. 相关产品: 1、ExoView外泌体全面表征试剂盒:https://www.biomart.cn/infosupply/99137706.htm 2、全自动外泌体荧光检测分析系统:https://www.biomart.cn/infosupply/94920084.htm
过滤孔,导致膜的寿命减短,分离效率较低。同时,外泌体会粘附在膜上,导致产量降低。 免疫磁珠法:用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。该方法分离得到的外泌体的生物活性易受 pH 和盐浓度影响,不利于下游实验。 试剂盒分离法:目前商业化的外泌体提取试剂盒多种多样,提取效果良莠不齐。同时试剂盒本身的价格比较高,且外泌体的得率和纯度一般,不是性价比高的一种分离方法。此方法得到的外泌体对于后续的鉴定实验、细胞实验和动物实验等可能有影响。 五、如何鉴定外泌体
特性,采用多种方法联合进行分离纯化,这使得高产量的外泌体分离纯化变得非常具有挑战性。目前,基于不同原理的技术已被用于外泌体分离,包括超速离心法、超滤法、免疫亲和层析、基于电荷中和的聚合物沉淀法、尺寸排阻色谱、微流体技术、切向流过滤等。尽管研究人员已经开发并优化了一些外泌体纯化方法,但目前仍然很难以一种特定的方法解决所有相关的挑战,如分离效率低、样品损失、外泌体回收率和纯度低,以及批次间差异等问题。4.3.3 质量检测方法和标准的问题在质量控制方面,全面表征外泌体至关重要。鉴于外泌体的异质性,生产
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