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ReadiUse ddNTP终止子混合物由 4 种等摩尔的 2',3'-ddNTP 组成,包括 ddATP、ddGTP、ddTTP 和 ddCTP。 它们以 100 mM 溶液形式提供,可以很容易地添加到测序溶液或其他生物样品中。 所有 2',3'-ddNTP 均经过高度纯化。
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文献和实验(1)SILVER SEQUENCETM DNA 测序试剂盒。 (2)丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺储备液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉双丙烯酰胺 W/V):95g丙烯酰胺,5g甲叉双丙烯酰胺溶于140ml 双蒸水中,定容至250ml,0.45mm过滤器过滤后,贮于棕色瓶中,置于4℃冰箱可保存2周。 (3)10%过硫酸铵,0.5g过硫酸铵溶于4ml水中,定容至5ml,应新配新用。 (4)10×TBE缓冲液(1 mol/L Tris,0.83mol/L 硼酸,10mmol/L EDTA): 121.1g
(适用于dGTP): 80mmol/L dGTP,80mmol/L dATP,80mmol/L dCTP,80mmol/L dTTP,50mmol/L NaCL。 7、ddG终止混合物 (适用于dGTP):dNTP A溶液再加 8mmol/L ddGTP。 8、ddA终止混合物 (适用于dGTP):dNTP A溶液再加 8mmol/L ddATP。 9、ddT终止混合物(适用于dGTP):dNTP A溶液再加 8mmol/L ddTTP。 10、ddC 终止混合物(适用于dGTP):dNTP
结构化的区域。二、材料待测已提纯的DNA,可为单链,也可为双链。三、设备高压电泳仪,测序用电泳槽,制胶设备,PCR仪。四、试剂 (1)SILVER SEQUENCETM DNA测序试剂盒。(2)丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺储备液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉双丙烯酰胺 W/V):95g丙烯酰胺,5g甲叉双丙烯酰胺溶于140ml 双蒸水中,定容至250ml,0.45mm过滤器过滤后,贮于棕色瓶中,置于4℃冰箱可保存2周。(3)10%过硫酸铵,0.5g过硫酸铵溶于4ml水中,定容至5ml,应新配新用
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