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无锡云萃生物
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文献和实验偶联链霉亲和素(SA)和抗体的实验方法及偶联实验过程中的一些注意事项。 一、羧基磁珠偶联链霉亲和素(SA)和抗体的原理 EDC通过与磁珠上的羧基进行反应,形成一种促发剂——不稳定的脲衍生物,NHS通过形成更稳定的酯而增强碳二亚胺交联产物的稳定性。交联过程中EDC、NHS不进入最终产物中,而是转变成水溶性的脲衍生物。 二、羧基磁珠偶联链霉亲和素(SA) 1. 偶联条件 1.1. 活化剂:EDC和NHS 1.2. 反应温度:37℃环境 1.3. 反应时间:
1.生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应,能够用高效DNA提取,满足微量生物样本DNA提取的要求。 2.磁珠表面能够进行化学修饰,从而与DNA进行特异性吸附,去除样品DNA溶液中的抑制物质,如:有机溶剂、去污剂、金属离子、燃料等。 3.生物磁珠表面功能团数量可以控制获得可提取DNA溶液的浓度信息,实现定量的要求。 4.生物磁珠可以通过特殊的合成工艺使其具有超顺磁特性,因此,能够通过仪器进行自动化操作,满足数据库建设对大批量样本提取的需要,减少人为因素。 5.用时少,操作
凝集素,四聚体球蛋白,含有糖基结合位点,因此 ConA 是一种糖类结合蛋白。ConA 磁珠能与细胞膜上的糖蛋白结合,从而吸附细胞,使对细胞的实验操作可视化,减少在后续实验过程中的细胞的损失。 不建议使用离心法代替 ConA beads,因为离心法不适合于低细胞数,在洗涤的过程中,损失很大,而且大肠杆菌残留的 DNA 无法进行可靠的校准。 5.做 ChIP-seq 的时候不需要二抗,CUT&Tag 二抗的作用是什么?二抗是必须的吗?可以用带修饰(比如 HRP 修饰)的二抗





