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文献和实验相关专题 Thermo Scientific Pierce近日推出了HiPPR去垢剂去除离心柱/离心板,可更快更彻底地从细胞裂解液及其他生物样品中去除去垢剂。这种即用型的产品适用于低浓度的蛋白及多肽样品。HiPPR树脂结合并去除去垢剂,同时很好地回收蛋白及多肽,便于下游的质谱分析。 大家都知道,去垢剂和表面活性剂是制备蛋白和多肽样品时常常使用的成分。然而,它们也会干扰下游的ELISA、等电聚焦和质谱分析。请
。epoxomicin 处理后,通过四种不同方法处理 HeLa 细胞裂解物 (150 g)。将得到的流穿 (F) 和洗脱 (E) 馏分进行体积归一化,与原始未处理裂解物 (H) 进行体积归一化,并选择相同体积进行蛋白印迹检测。与供应商 Cs kit 和基于抗体的方法相比,thermo Scientific Pierce 泛素富集试剂盒在洗脱组分中获得了更多的泛素化蛋白(在流穿组分中获得的蛋白较少),表明泛素化蛋白的富集效果明显更好。GSH 树脂是用于比较的阴性对照。4、S-nitrosylation: 一氧化氮
。Triton-X-100抽提Frizzled-4效果很差,相反,TM-PEK试剂A得到的Frizzled-4在western blot中获得了明显的信号。而TM-PEK试剂对CELSR-3的抽提效果非常令人惊喜,这种全长的358kD蛋白只有TM-PEK试剂A才能获得,而SDS或Triton X-100效果都使人失望。 2. Thermo旗下Pierce的膜蛋白分离试剂盒(货号89881)——该试剂盒首先采用biotin标记膜蛋白(该膜蛋白一般需要有暴露在膜外的赖氨酸残基和足够长度的膜外
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