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文献和实验荧光二抗的选择――Dylight荧光与传统荧光标记的比较 顾名思义,荧光二抗 通常指代的就是带荧光团标记的二抗,这样的二抗可以通过观察其在不同波长下荧光的强度来确定其二抗的含量。常见的荧光团包括FITC、Rhodamine、Texas Red、PE、Cy系列等。比如FITC即异硫*酸荧光素,是目前应用最广泛的荧光素。最大吸收光波长为490~495nm,最大发射光波长为 520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。其优势是分子量较小为389.4,每一个抗体可标记几个
【共享】荧光二抗的选择——Dylight荧光与传统荧光标记的比较
光的最大波长为550nm,最强发射光为570nm。因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中,可使用和TRITC一样的滤波片。Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。由于它的最大发射波长在670nm,Cy5很难用裸眼观察,而且不能用汞灯作理想的激发。通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。下面我们看一组荧光二抗的比照图片: 我们知道,FITC的绿色荧光强度肉眼观察已经很亮了,但是从左上面的图可见,与Cy2相比还是偏弱,而Dylight 488
感;良好的稳定性和活性染料的标记率。Alexa Fluor 488在较宽的PH值范围内保持稳定(PH4~10);FITC激发波长488nm,最大发射波长525nm;缺点荧光强度易受PH值影响,PH值降低时其荧光强度减弱。橙红色(543-555nm处激发) CF 543、AlexaFluor 546、ATTO550, Cy 3,DyLight 549, Rhodamine (TRITC) 匹配543nm的橙色荧光染料;CF ? 543 荧光条带明亮,耐光,水溶性好,确保了CF 543染料与抗体的耦联物
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