HABA

纯化 Strep-Tag 融合蛋白

，HABA 无法与生物素进行竞争，需以 NaOH 进行再生。但之后仍可使用 HABA 检验填料是否成功再生。)   Strep-Tactin®/Strep-Tactin®XT 纯化操作步骤：   所有的步骤应在适合您融合蛋白的温度中进行 (4°C 至 25°C 之间)。为了获得最好的纯化效果，请依照指示的容量及比例进行操作 (如: 柱床体积、清洗缓冲液的多寡等)。当蛋白表达量少时，请勿改变其他缓冲液用量，而是加入更多的细胞提取液，以完整利用柱体中填料的载量。   下表为使用二代或三代填料，对标准纯化

生物素标记蛋白操作方法

超纯水中，加入足够量浓度的生物素，一般对于10 mg/ml 蛋白来说超过12倍分子数，对于2 mg/ml 蛋白溶液应超过20倍，或者该试剂也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中 3. 室温30分钟，或冰上放置2小时。 4. 用30 ml PBS预洗纯化柱，上样，加入与欲收集量相同的缓冲液，收集0.5 ml 或1 ml 于单独的管中。 5. 以280 nm 的吸收值测定蛋白含量。 6. 生物素化的蛋白4℃存放至使用，可加入叠氮钠、甘油等保存。 HABA法检测生物素标记效果