- ￥380
- LMAI Bio/联迈生物
- LM8DBE009
- 中国/上海
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 保质期：
详见说明
- 供应商：
联迈生物
- 保存条件：
详见说明
- 规格：
100ml
名称：无血清细胞冻存液
品牌：联迈生物/LMai Bio
货号：LM8DBE009
规格：100mL
保存：4°C
细胞冻存步骤：
1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中；
2. 确认所需冻存的细胞数量；
3. 将所需冻存细胞收集于离心管中，1000rpm，5min 离心，收集细胞沉淀，并弃掉上清液；
4. 加入适量的无血清细胞冻存液于离心管中，加入量按照细胞保存浓度为 5X105 至 1X107/ml 密度，轻柔的混匀细胞，获取细胞混合液；
5. 将获取的细胞混合液按照 1~1.5ml/管，分装于冻存管中；
6. 将冻存管直接放入-80℃保存，可长期保存。
细胞复苏步骤：
1. 从-80℃取出冻存细胞，立即放入 37℃水浴锅快速解冻；
2. 待细胞混合液彻底解冻融化后，立即加入 1ml 细胞培养基，混合；
3. 将混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中，1000rpm，5min离心，弃掉上清，获取细胞沉淀；
4. 加入适量的新鲜细胞培养基，轻柔混匀，并将混合液转移至培养容器，观察细胞状态正常后，进行后续细胞培养工作。
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文献和实验一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的，去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体，而外泌体专用无血清培养基，也不是适合所有的细胞，常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长，而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了，所以也需要一些预实验的摸索。 还有，那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢？这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下，是处于饥饿状态的，细胞会将培养
培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
高，湿度大，各位小伙伴们辛苦做实验的同时，一定记得按照规范操作和保存实验用品，注重实验室通风和安全哦~1 Wshtbio 蛋白电泳预制胶这是一款美国 EZBiolab 公司开发高性能超低成本聚丙烯酰胺预制凝胶，专利凝胶和缓冲液配方，分辨率高，条带清晰，电泳效果极佳。胶夹打开轻松，电泳时间短，40-50 分钟即可完成。兼容市场上主流的 mini 电泳槽， 凝胶中不含 SDS，可用于变性及非变性电泳。2 NCM Biotech 无血清细胞冻存液CELLSAVING® 是一种即用型无血清细胞冻存液，通
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