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ROS Brite DHCF
1年
恒斐生物
在零下15度以下保存, 避免光照
1 mg
货号 | 16053 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 1 mg | 价格 | 2544 | |
Ex (nm) | 560 | Em (nm) | 575 | |
分子量 | 701.50 | 溶剂 | DMSO |
ROS Brite染料的分析方案
该说明书仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改。 在制备ROS Brite™工作溶液之前,根据需要处理细胞或动物。
1)在DMSO中制备10至20mM ROS Brite储备溶液。 通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液(HHBS)的Hanks溶液中,制备5至10μM的工作溶液。
2)根据需要处理细胞(例如,用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。
3)用ROS Brite(5-10μM,步骤#1)在37℃孵育细胞15-30分钟。
注意:使用的ROS Brite浓度因细胞系不同而不同,需要进行不同浓度的测试才能获得最佳剂量。 对于Cat#16053,可以使用较低的浓度,例如0.5-5μM。
4)用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。
5)用合适的荧光仪器(例如荧光显微镜,流式细胞仪或体内成像仪器)分析细胞。
参考文献
An oxidative stress mechanism of shikonin in human glioma cells
Authors: Yang JT, Li ZL, Wu JY, Lu FJ, Chen CH.
Journal: PLoS One (2014): e94180
Association rule mining of cellular responses induced by metal and metal oxide nanoparticles
Authors: Liu R, France B, George S, Rallo R, Zhang H, Xia T, Nel AE, Bradley K, Cohen Y.
Journal: Analyst (2014): 943
HPLC-based monitoring of products formed from hydroethidine-based fluorogenic probes--the ultimate approach for intra- and extracellular superoxide detection
Authors: Kalyanaraman B, Dranka BP, Hardy M, Michalski R, Zielonka J.
Journal: Biochim Biophys Acta (2014): 739
Low Amounts of Mitochondrial Reactive Oxygen Species Define Human Sperm Quality
Authors: Marques M, Sousa AP, Paiva A, Almeida-Santos T, Ramalho-Santos J.
Journal: Reproduction. (2014)
Muscadine grape skin extract reverts snail-mediated epithelial mesenchymal transition via superoxide species in human prostate cancer cells
Authors: Burton LJ, Barnett P, Smith B, Arnold RS, Hudson T, Kundu K, Murthy N, Odero-Marah VA.
Journal: BMC Complement Altern Med (2014): 97
Nonthermal plasma induces head and neck cancer cell death: the potential involvement of mitogen-activated protein kinase-dependent mitochondrial reactive oxygen species
Authors: Kang SU, Cho JH, Chang JW, Shin YS, Kim KI, Park JK, Yang SS, Lee JS, Moon E, Lee K, Kim CH.
Journal: Cell Death Dis (2014): e1056
Subneurotoxic copper(II)-induced NF-kappaB-dependent microglial activation is associated with mitochondrial ROS
Authors: Hu Z, Yu F, Gong P, Qiu Y, Zhou W, Cui Y, Li J, Chen H.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol (2014): 95
The acute inhibitory effect of iodide excess on sodium/iodide symporter expression and activity involves the PI3K/Akt signaling pathway
Authors: Serrano-Nascimento C, da Silva Teixeira S, Nicola JP, Nachbar RT, Masini-Repiso AM, Nunes MT.
Journal: Endocrinology (2014): 1145
总活性氧(ROS)检测
活性氧(ROS)是氧正常代谢的天然副产品,在细胞信号中起着重要作用。总ROS检测试剂/试剂盒可以检测活细胞中的ROS。它与ROS反应时,会产生荧光。细胞内总ROS检测试剂/试剂盒有多种规格、颜色,可适用于多种仪器。
产品名称 | 货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 适用仪器 |
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 | #22900 | 200 Tests | 492/520 | 荧光显微镜/荧光酶标仪 |
#22901 | 200 Tests | 520/605 | 荧光显微镜/荧光酶标仪 | |
#22903 | 200 Tests | 658/675 | 荧光显微镜/流式细胞仪 | |
#22904 | 100 Tests | 490/520 | 流式细胞仪 | |
探针 | #16050 | 1 mg | 498/517 | |
#16051 | 1 mg | 498/517 | ||
#16053 | 1 mg | 560/575 |
图1.用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒检测HeLa细胞中的ROS。将HeLa细胞以15,000个细胞/ 90 µL /孔在Costar黑色/透明底部96孔板中过夜接种。将细胞未经处理(对照)或在37°C下用1 mM H2O2或100 µM叔丁基氢过氧化物(TBHP)处理30分钟。加入ROS Brite 670工作溶液(100 µL /孔),并在5%CO2和37°C的培养箱中孵育1小时。使用FlexStation(Molecular Devices)以底部读取模式在Ex / Em = 650/675 nm(cut off= 665 nm)处检测荧光信号。 |
图2.在Costar黑色/透明底部96孔板中,用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒染色的Hela细胞图像。A:未经处理的对照细胞。 B:细胞在染色前用100 µM氢过氧化叔丁基(TBHP)处理30分钟。 |
图3. ROS Brite 700对PBS缓冲液(pH 7.2)中不同活性氧的荧光响应。用Ex / Em = 670 / 700nm测量荧光强度。 |
各种探针可检测的活性氧种类
活性氧种类 | ROS Brite 570 | ROS Brite 670 | ROS Brite 700 | ROS Brite HDCF | Amplite ROS Green | Amplite ROS Red |
H2O2 | + | + | + | +++ | +++ | +++ |
•OH | ++ | ++ | ++ | + | + | + |
TBHP | + | + | + | + | + | + |
HOCl | - | + | ++ | - | + | - |
O2•- | + | ++ | ++ | - | - | - |
NO | - | - | - | - | - | - |
ONOO- | - | - | - | - | - | - |
货号 | 22902 | 22903 | 16004 | 16053 | 22900 22904 |
22901 |
过氧化氢(H2O2)检测
货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 适用仪器 | 适用样本 | |
Amplite 荧光法过氧化氢检测试剂盒 | #11502 | 500 Tests | 648/668 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
#11501 | 500 Tests | 571/584 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 | |
Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 | #11503 | 200 Tests | 498/517 | 荧光酶标仪/荧光显微镜 | 细胞 |
#11504 | 100 Tests | 405/450 | 荧光显微镜 | 细胞 | |
#11505 | 100 Tests | 405/450 | 流式细胞仪 | 细胞 | |
#11506 | 100 Tests | 498/517 | 流式细胞仪 | 细胞 | |
探针 | #15204 | 25 mg | 505/526 | 细胞 | |
#15206 | 10 mg | 507/529 | 细胞 | ||
#15203 | 25 mg | 498/517 | 细胞 |
图1.H2O2浓度由DA单独产生,并具有来自C-syn α 15分钟(浅灰色)、30分钟(深灰色)和60分钟(黑色)的C-终端序列中的各种肽。DA 本身(无肽)随着时间的推移产生越来越多的 H2O2。DA 与 YEMPS 肽的共育增强 H2O2生产,而缺乏肽的 Y127-(EMPSEEGY)和 S129-(NEAYEMP)比 DA 单独或使用 YEMPS 肽产生的 H2O2较少。此外,DA与海氨酸突变肽(YEAPS)的联育在所有条件下产生最高量的H2O2。*p |
图2.使用Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒(Cat#11503)在HeLa细胞中细胞内过氧化氢的荧光图像。在37℃下用(左)或不用(右)100 µM过氧化氢处理HeLa细胞90分钟。 |
图3. 使用Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒(货号:11506)检测Jurkat细胞中的过氧化氢。将Jurkat细胞用OxiVision™Green过氧化物探针染色30分钟,并在37°C下用100 µM过氧化氢处理90分钟。用OxiVision™绿色过氧化物探针染色但未进行过氧化氢处理的细胞用作对照。 |
过氧化物酶类检测
名称 | 货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 仪器 | 适用样本 |
Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 | #11306 | 200 Tests | 571/584 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
#11552 | 500 Tests | 571/584 | |||
#11553 | 500 Tests | 648/668 | |||
Amplite 荧光法MPO检测试剂盒 | #11301 | 200 Tests | 571/584 | ||
ReadiUse 哺乳动物细胞裂解液 | #20012 | 10 ml | / |
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