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现货
活性氧 ROS Brite HPF
1年
恒斐生物
在零下15度以下保存, 避免光照
1 mg
货号 | 16051 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 1 mg | 价格 | 1896 | |
Ex (nm) | 498 | Em (nm) | 517 | |
分子量 | 424.40 | 溶剂 | DMSO |
适用仪器
流式细胞仪 | |
激发: | 488nm激光 |
发射: | 530/30nm滤波片 |
通道: | FITC通道 |
荧光显微镜 | |
激发: | FITC滤波片 |
发射: | FITC滤波片 |
推荐孔板: | 黑色透明孔板 |
荧光酶标仪 | |
激发: | 490nm |
发射: | 525nm |
cutoff: | 515nm |
推荐孔板: | 黑色孔板 |
ROS Brite 染料的分析方案
该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。在制备ROS Brite 工作溶液之前,根据需要处理细胞。
1)在DMSO中制备10至20mM ROS Brite APF(或HPF)储备溶液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液(HHBS)的Hanks溶液中,制备1至10μM的工作溶液。
2)根据需要处理细胞(例如,用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。
3)用ROS Brite APF(或HPF)(1-10μM,步骤#1)在37℃孵育细胞20-60分钟。
4)用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。
5)用适当的荧光仪器在Ex / Em = 490 / 525mm(截止= 515nM)下用底部读取模式分析细胞(例如,用于荧光显微镜的FITC滤光片,用于流式细胞仪的FL1滤光片)。
注意:BSA和酚红会影响荧光,应谨慎使用。 APF和HPF均可用于溶液测定或细胞内测量。
参考文献
Developmental toxicity evaluation of three hexabromocyclododecane diastereoisomers on zebrafish embryos
Authors: Du M, Zhang D, Yan C, Zhang X.
Journal: Aquat Toxicol (2012): 1
MAPK inhibitors and siRNAs differentially affect cell death and ROS levels in arsenic trioxide-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1611
MG132, a proteasome inhibitor, induces human pulmonary fibroblast cell death via increasing ROS levels and GSH depletion
Authors: Park WH, Kim SH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1284
beta-Lapachone induces heart morphogenetic and functional defects by promoting the death of erythrocytes and the endocardium in zebrafish embryos
Authors: Wu YT, Lin CY, Tsai MY, Chen YH, Lu YF, Huang CJ, Cheng CM, Hwang SP.
Journal: J Biomed Sci (2011): 70
Enhancement of gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell death by N-acetyl cysteine and L-buthionine sulfoximine
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 992
Gallic acid-induced lung cancer cell death is accompanied by ROS increase and glutathione depletion
Authors: You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Mol Cell Biochem (2011): 295
总活性氧(ROS)检测
活性氧(ROS)是氧正常代谢的天然副产品,在细胞信号中起着重要作用。总ROS检测试剂/试剂盒可以检测活细胞中的ROS。它与ROS反应时,会产生荧光。细胞内总ROS检测试剂/试剂盒有多种规格、颜色,可适用于多种仪器。
产品名称 | 货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 适用仪器 |
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 | #22900 | 200 Tests | 492/520 | 荧光显微镜/荧光酶标仪 |
#22901 | 200 Tests | 520/605 | 荧光显微镜/荧光酶标仪 | |
#22903 | 200 Tests | 658/675 | 荧光显微镜/流式细胞仪 | |
#22904 | 100 Tests | 490/520 | 流式细胞仪 | |
探针 | #16050 | 1 mg | 498/517 | |
#16051 | 1 mg | 498/517 | ||
#16053 | 1 mg | 560/575 |
图1.用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒检测HeLa细胞中的ROS。将HeLa细胞以15,000个细胞/ 90 µL /孔在Costar黑色/透明底部96孔板中过夜接种。将细胞未经处理(对照)或在37°C下用1 mM H2O2或100 µM叔丁基氢过氧化物(TBHP)处理30分钟。加入ROS Brite 670工作溶液(100 µL /孔),并在5%CO2和37°C的培养箱中孵育1小时。使用FlexStation(Molecular Devices)以底部读取模式在Ex / Em = 650/675 nm(cut off= 665 nm)处检测荧光信号。 |
图2.在Costar黑色/透明底部96孔板中,用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒染色的Hela细胞图像。A:未经处理的对照细胞。 B:细胞在染色前用100 µM氢过氧化叔丁基(TBHP)处理30分钟。 |
图3. ROS Brite 700对PBS缓冲液(pH 7.2)中不同活性氧的荧光响应。用Ex / Em = 670 / 700nm测量荧光强度。 |
各种探针可检测的活性氧种类
活性氧种类 | ROS Brite 570 | ROS Brite 670 | ROS Brite 700 | ROS Brite HDCF | Amplite ROS Green | Amplite ROS Red |
H2O2 | + | + | + | +++ | +++ | +++ |
•OH | ++ | ++ | ++ | + | + | + |
TBHP | + | + | + | + | + | + |
HOCl | - | + | ++ | - | + | - |
O2•- | + | ++ | ++ | - | - | - |
NO | - | - | - | - | - | - |
ONOO- | - | - | - | - | - | - |
货号 | 22902 | 22903 | 16004 | 16053 | 22900 22904 |
22901 |
过氧化氢(H2O2)检测
货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 适用仪器 | 适用样本 | |
Amplite 荧光法过氧化氢检测试剂盒 | #11502 | 500 Tests | 648/668 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
#11501 | 500 Tests | 571/584 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 | |
Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 | #11503 | 200 Tests | 498/517 | 荧光酶标仪/荧光显微镜 | 细胞 |
#11504 | 100 Tests | 405/450 | 荧光显微镜 | 细胞 | |
#11505 | 100 Tests | 405/450 | 流式细胞仪 | 细胞 | |
#11506 | 100 Tests | 498/517 | 流式细胞仪 | 细胞 | |
探针 | #15204 | 25 mg | 505/526 | 细胞 | |
#15206 | 10 mg | 507/529 | 细胞 | ||
#15203 | 25 mg | 498/517 | 细胞 |
图1.H2O2浓度由DA单独产生,并具有来自C-syn α 15分钟(浅灰色)、30分钟(深灰色)和60分钟(黑色)的C-终端序列中的各种肽。DA 本身(无肽)随着时间的推移产生越来越多的 H2O2。DA 与 YEMPS 肽的共育增强 H2O2生产,而缺乏肽的 Y127-(EMPSEEGY)和 S129-(NEAYEMP)比 DA 单独或使用 YEMPS 肽产生的 H2O2较少。此外,DA与海氨酸突变肽(YEAPS)的联育在所有条件下产生最高量的H2O2。*p |
图2.使用Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒(Cat#11503)在HeLa细胞中细胞内过氧化氢的荧光图像。在37℃下用(左)或不用(右)100 µM过氧化氢处理HeLa细胞90分钟。 |
图3. 使用Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒(货号:11506)检测Jurkat细胞中的过氧化氢。将Jurkat细胞用OxiVision™Green过氧化物探针染色30分钟,并在37°C下用100 µM过氧化氢处理90分钟。用OxiVision™绿色过氧化物探针染色但未进行过氧化氢处理的细胞用作对照。 |
过氧化物酶类检测
名称 | 货号 | 规格 | Ex/Em(nm) | 仪器 | 适用样本 |
Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 | #11306 | 200 Tests | 571/584 | 荧光酶标仪 | 细胞裂解液 |
#11552 | 500 Tests | 571/584 | |||
#11553 | 500 Tests | 648/668 | |||
Amplite 荧光法MPO检测试剂盒 | #11301 | 200 Tests | 571/584 | ||
ReadiUse 哺乳动物细胞裂解液 | #20012 | 10 ml | / |
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