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文献和实验影印 到15cm SD/-Leu 平板上。 3)生长48-72 小时，观察菌落生长情况，每个菌落长至3-5mm，分别印至绒布上。 再从绒布上影印到15cm 2xYPD 平板上。Y190 菌(携带PGB-X 诱饵质粒)的 96 个克隆和Y187 菌(携带pACT2-小文库基因质粒)的96 个克隆一一对齐， 影印到一起，使其发生Mating。30℃培养20~24 小时。 4)Mating 完成， 再用绒布把菌落从2xYPD 平板影印至 SD/-Trp-Leu-His+30mM
胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml [Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米
抗原免疫荧光检查：在24孔塑料培养板孔内放置无菌的盖玻片0.5cm×0.6cm，每孔中种植1ml含有105个细胞的原代或传代内皮细胞悬液。待内皮细胞生长至近融合状态时，取出盖玻片，用PBS冲洗3次，投入冷丙酮中(-18～-20℃)，细胞面向上，作用7min，用PBS冲洗3次，每次1min，而后进行间接免疫荧光检查，第一抗体为鼠抗人VWF单克隆抗体(苏州医学院血栓室提供)，1∶20倍稀释，加入50μl于盖玻片上，放入湿盒内4℃过夜。同时不加一抗做阴性对照。用PBS冲洗3次后，加入异硫氢酸标记的二抗50μl(异硫氰酸标记
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