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文献和实验人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
到每个细胞培养小室中。 等待 5 分钟,让 ECM基质胶固化。 4. 同时,将一孔浮肺芽类器官 (LBO) 转移到 60 mm培养皿中。 在单独的 96 孔 U 型底板中,向每个孔中加入 60 µL 3dGRO™ 肺类器官成熟培养基 (SCM308)。 注意:培养至20-25 天,会有许多漂浮的肺类器官(图 3)。 每个 ECM基质胶 包埋夹层应包含大约 4-6 个类器官。根据您计划制作的 ECM基质胶包埋夹层的数量,计算96 孔板中制备类器官/ECM基质胶悬浮液所需的孔总数。 5. 在无菌解剖
,比如Millicell® EZ SLIDE 8孔无菌腔室载玻片(货号PEZGS0816) 4.混合液37 0C孵育20分钟。也可以室温孵育,但凝固所需时间更久。 5.吸头轻触凝胶,检查凝胶是否形成。收回吸头后,吸头表面没有凝胶线代表成胶。 6.加入充足的培养基覆盖凝胶。 7.培养皿或培养瓶盖上盖子,在组织培养箱中培养。 8.培养1小时后,更换培养基(换液)。 9.细胞培养期间按照要求换液。 采用TrueGel3D™酶促细胞回收液溶解TrueGel3D™水凝胶细胞 向培养基中添加TrueGel3D™酶促细胞回收液
培养皿培养。24h后换成DF12+N2的无血清培养液,此后每三天半量换液1次。 瓶底星形胶质细胞的继续培养 25cm2培养瓶内的星形胶质细胞用D-Hanks液洗2次后常规传代,以1.5×105/cm2种入预先用100μg/L多聚赖氨酸包被好的35mm培养皿培养。培养液为GM,每三天半量换液1次。 动脉粥样硬化患者VSMC的提取 实验材料:眼科剪刀1把 眼科镊子2把 1×PBS约200ml M199培养液 离心机 5ml小皿 10ml大皿 实验步骤: 1.在超净台内用10ml的离心
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