总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)

双缩脲法（Biuret法）

基酸等。 此法的优点是较快速 ，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。 （二）试剂与器材 1. 试剂： （1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。牛血

血清总蛋白测定原理

1.双缩脲法 蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物。此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成的紫红色的反应相似，故称之为双缩脲反应。这种颜色反应强度在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比，医学教育网搜|集整理经与同样处理的蛋白质标准液比较，即可求得蛋白质含量。 2.微量凯氏定氮波氏显色法 血清中蛋白质及非蛋白含氮化合物经硫酸作用后变成铵，后者用酚－次氯酸盐试剂显色后测定总氮。总氮减去非蛋白氮，最后换算成蛋白含量。

血清总蛋白测定方法及临床意义

血清总蛋白测定有很多，最主要的有凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、比浊法、染料结合法和紫外分光光度法等，其中双缩脲法应用最广。它的原理主要是蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与二价铜离子（Cu2+）作用生成蓝紫色的化合物，这种颜色反应强度在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比，因此反应与两分子尿素缩合后的产物双缩脲与碱性铜溶液作用形成紫红色的反应相似，故称双缩脲反应。此反应操作简单，重复性好，干扰物质少，重复性好，在10-120g/L浓度范围内都有良好的线性关系，但灵敏度较低，是目前临床上首选的常规方法