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3X Flag Peptide
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5mg/ml×0.2ml
保存条件: -20℃保存,至少一年有效。P9801-25mg粉末装也可以4℃保存,一年有效。
使用说明:1.对于粉末装,由于微量的多肽在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或不可见的多肽层,所以在打开管盖前,建议在离心机中约8,000-12,000×g离心10-30秒,使附着在管盖或管壁上的多肽聚集于管底。2.对于粉末装,使用TBS进行溶液,一般用移液枪的枪头轻吹几下或者轻轻摇晃瓶子,即可使多肽完全溶解。请勿用vortex剧烈振荡,以免多肽变性而失活;溶液装可直接用于后续配制。3.免疫沉淀样品的3X Flag竞争洗脱法:本方法为非变性法,洗脱效率高,且洗脱后的样品中不含Flag抗体的轻链和重链。1)3X Flag多肽洗脱液的配制:根据样品量确定洗脱液的用量,取一定量3X Flag多肽储存液用TBS溶液进一步稀释3X Flag多肽溶液至150μg/ml。2)每个免疫沉淀样品加入100μl 3X Flag多肽洗脱液(150μg/ml),冰浴并摇晃孵育30分钟-2小时,为了提高洗脱效率,可延长孵育时间或重复洗脱。3X Flag多肽洗脱液体积一般为凝胶悬液的5倍。3)4℃,6000×g离心30秒,小心转移上清至新管中,上清即为洗脱的Flag融合蛋白。注意不要吸到凝胶。4.洗脱的Flag融合蛋白置于4℃待用,或者-20℃长期保存。
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