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- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
详情介绍
- 保质期：
三年
- 英文名：
详见说明书
- 库存：
99
- 供应商：
上海梵态生物科技有限公司
- CAS号：
详见说明
- 规格：
50ml
规格：10ml/100ml/500ml等
保存条件：常温
标准溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標簽。
2 。在校正前，準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
无血清细胞冻存液
注意事项：
无血清细胞冻存液
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
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文献和实验一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的，去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体，而外泌体专用无血清培养基，也不是适合所有的细胞，常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长，而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了，所以也需要一些预实验的摸索。 还有，那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢？这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下，是处于饥饿状态的，细胞会将培养
pH至7.7，过滤除菌分装，然后-20℃保存备用。EDTA液配方（0.2% 1000ml）EDTA（versene） 2 gNaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO4（12H2O） 2.9gKH2PO 40.2g以上药物同样充分溶解后，加新鲜的三蒸水至1000 ml，分装然后高压15磅30分钟灭菌，最后4℃保存备用。细胞冻存液：小牛血清90℅与二甲基亚砜（DMSO）10℅混合；-20℃冰箱保存备用。或小牛血清30℅，1640培养液60℅，DMSO10℅混合； - 20℃冰箱保存备用。
培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
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