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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
HPDLF
- 库存:
100
- 供应商:
上海富雨
- 肿瘤类型:
人牙周膜成纤维细胞HPDLF
- 细胞类型:
详见说明
- 品系:
详见说明
- 组织来源:
牙周膜;成纤维细胞
- 相关疾病:
详见说明
- 物种来源:
原代
- 免疫类型:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 是否是肿瘤细胞:
人牙周膜成纤维细胞HPDLF
- 器官来源:
牙周膜;成纤维细胞
- 运输方式:
常温或者干冰
- 年限:
详见说明
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |
显微镜下部分细胞产品的形态:
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文献和实验倒去培养基,先加入PBS1ml,再加入0.25%胰酶1ml,轻轻晃动培养瓶,使之分布均匀;约10秒。将培养瓶迅速转至镜下观察,镜下见细胞触角变钝,细胞变圆,将瓶侧立回到无菌台内,到掉胰酶,加入2mlDMEM培养基(内涵20%胎牛血清),终止消化,弯管吹打成单细胞,可再在镜下观察,确定是否吹打完全。按1:3或1:2传代,加入适量新鲜培养基后,1.5-2.0ml。放入CO2培养箱。注意:时间宁短勿长。宁愿消化不足也不能消化过,PDLC细胞不能等到细胞长融合再传代,长到80%左右就可以传代
选用来源充足、方便、材料新鲜无污染,选取细胞容易分离的部位。如血管上皮可以选用肠系膜中动脉、成纤维细胞可以选择肺组织或者皮肤组织等。 (三) 供体的选择 一般说来,幼稚状态的组织和细胞,如:动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养。而成年和老年动物的细胞成活率较低。原代分离干细胞和没有增值能力的细胞时,首选动物的胚胎。 有研究表明经组织块法原代培养获得的人牙周膜细胞的成功率不同,12~14 岁组最高,成功率为 66.67%;15~18 岁组次之,成功率为 8.57%
+成纤维细胞在心脏细胞的特殊定位。研究结果表明,mir-16-2-3p 在各种主要细胞类型之间的表达相似。此外,研究人员还将慢病毒注射进 db/db 小鼠心脏内,结果发现小鼠静脉注射 FITC 标记的凝集素显示 Micro 组的微循环改善,这也表明了 db/ db 小鼠心脏中 mir-16-2-3p 的过表达与心脏改善功能、纤维化和微循环存在联系。 图 3 来自 DM、DM-CMD 和 DM-CAD 的血清来源的外泌体的分离和表征(图源:[3]) 4. 二型糖尿病病损肝脏来源的外泌体通过 Fasn








