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- FUYUBIO
- 国产/进口
- FY-FN3759
- 2025年12月23日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Hut-102
- 库存：
100
- 细胞类型：
详见说明
- 品系：
详见说明
- 组织来源：
皮肤；T淋巴瘤
- 相关疾病：
详见说明
- 物种来源：
ATCC
- 免疫类型：
详见说明
- 细胞形态：
详见说明
- 器官来源：
皮肤；T淋巴瘤
- 运输方式：
常温或者干冰
- 年限：
详见说明
- 生长状态：
悬浮
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞运输： | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶） |
显微镜下部分细胞产品的形态： 
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single－cell transcriptome sequencing data
期刊：MODERN ONCOLOGY，Aug．2023，VOL. 31，No. 16
作者：HU Wu1，WEN Yiqiao2，QIN Jialan1，ZHAO Ying3，ZHANG Tianbiao1
DOI：10．3969 /j．issn．1672－4992．2023．16．003
人类组织肿瘤细胞 10104 人淋巴瘤细胞(B类)A-204 人横纹肌肉瘤A375 人皮肤黑色素瘤细胞A431 人皮肤基底细胞癌A549 人肺癌细胞A875 人黑色素瘤细胞BeWo 人胎盘绒毛癌细胞BGC-823 人胃腺癌细胞BT474 人乳腺导管瘤CACO-2 人结肠癌细胞CaLu-3 人肺腺癌细胞CASKI 人宫颈癌Colo205 人结肠癌Colo320DM 人结肠癌D341 Med 人髓母细胞瘤Daudi 人B淋巴细胞瘤DMF7 双位点HC-KIT
血清为待测标本。2、Ab1包被：用0.05MpH9.6碳酸盐包被缓冲液将抗Tac特异性单克隆抗体(Ab１)犗!释至5μg/ml，加至ELISA板，100μl/孔，4℃包被72小时。3、封闭：1％BSA-PBS封闭，350μl/孔，37℃孵育2小时。4、加样：ELISA板用PBS-T洗液洗3次，牻 PHA刺激单个核细胞培养上清及对照组上清或病人血清倍比稀释至1∶1024，每一稀释度取100μl加至ELISA板。犙!HUT-102B2细胞培养上清为阳性对照，RPMI1640-10％FCS培养液为阴性
，牻+PHA刺激单个核细胞培养上清及对照组上清或病人血清倍比稀释至1∶1024，每一稀释度取100μl加至ELISA板。犙!HUT-102B2细胞培养上清为阳性对照，RPMI1640-10%FCS培养液为阴性对照。37℃，孵育2小时，洗涤。 5. 加酶标抗体：于各反应孔加辣根过氧化物酶标记另一种抗 Tac 特异性单克隆抗体Ab2以效价滴定的最佳稀释度稀释)100μl。37℃孵育2小时，洗涤。 6. 加底物显色：各反应孔加新鲜配制ABTS底物溶液100μl
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