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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-70℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
DH5α Electroporation-Competent Cell
- 库存:
5支
- 供应商:
上海富雨
- 规格:
50ul
产品介绍:本公司生产的感受态细胞是采用大肠杆菌菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA 的化学转化。使用 pUC19 质粒检测,转化效率可达 108 cfu/µg,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用,降低了实验的成本。质量稳定,使用方便,质优价廉。
基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA
产品特点:
一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型株。其φ80 lacZΔM15 基因的产物可与 pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。操作步骤(以下操作均按无菌条件的标准进行):
-
- 取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。
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- 向感受态细胞悬液中加入目的 DNA ,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置 30 分钟。
- 将离心管置于 42℃水浴中放置 60 秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却 2 分钟,该过程不要摇动离心管。(此步骤也可将离心管置于室温进行,时间不需十分准确,夏季或室温较高时,可放置5-8分钟左右;如果室温较低,可延长时间至 8-15 分钟左右。条件允许建议使用 42℃热激方法。)
- 向每个离心管中加入 500μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基(不含抗生素),混匀后置于 37℃, 150rpm,摇床振荡培养 60 分钟,目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
-
- 无菌条件下,取适量菌液加到含相应抗生素的 LB 固体培养基平板上,用无菌的细菌涂布器或玻璃珠将细胞均匀涂开。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板,37℃培养 12-16 小时。(涂布用量可根据具体实验来调整。转化质粒在 10ng 左右,90mm 平皿涂布 100µl,55mm 平皿涂布 50µl;连接产物的转化菌液建议离心后倒掉大部分上清,余 200µl,取 100µl 用于涂布。)
- 保留剩余的菌液于 4℃冰箱中,视平板上菌落生长情况决定去留。
上海富雨生物简介
上海富雨生物科技有限公司(Shanghai Fuyu Biotechnology Co., Ltd)面向国际市场专业研发、生产和销售ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白及相关试剂。产品在免疫学、信号转导、代谢、神经科学等领域内都有最前沿科学文献发表,被国内外多所大学、研究机构和药学平台使用并发表文献多达1000多次。产品主销国外市场,在40多个国家设有代理商,全球合作商达100余个。上海富雨生物科技有限公司凭借优异的产品和完善的服务体系现已受到广大国内外用户的青睐和认可。科研好帮手,专业生产商
品牌优势
1、产品优势:产品具有高特异性、回收率高、线性好、变异系数低、稳定性好;
2、质量保证:产品质量稳定,每批次产品必须通过QA、QC检测才可出库;
3、实力强大: 标准实验室、研发中心,动物房 ;
4、技术支持:技术部5*8小时技术问题及时解答;
5、服务周到:发货及时,三个工作日顺丰快递;售后无忧,包退包换。
研发、生产科研产品:ELISA试剂盒:多种属、1000多种指标:人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、仓鼠、猪、马、鸡、犬、豚鼠、猴、绵羊
抗体:兔多抗、鼠单抗种类丰富,一抗1万余种,二抗100多种;
重组蛋白:多项发明专利,原核表达系统稳定表达蛋白1000余种。DH5α 电转、DH5α 电击、DH5α 超转 DH5α 电转、DH5α 电击、DH5α 超转 DH5α 电转、DH5α 电击、DH5α 超转 DH5α 电转、DH5α 电击、DH5α 超转 DH5α 电转、DH5α 电击、DH5α 超转 DH5α 电转、DH5α 电击、DH5α 超转
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文献和实验期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16
作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1
DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
woowe97417 要转一个带氯霉素抗性的质粒到DH5α保存,但是发现用的DH5α对氯霉素不敏感,氯霉素是用无水乙醇配的,有做过类似实验的站友帮忙解答一下,谢谢啦! gingivalis 严谨型质粒 25 ug/ml 松弛性质粒 170 ug/ml 《现代分子生物学实验技术》--P753 (卢圣栋) DH5α应该对氯霉素敏感,如果在上述两个浓度条件下,DH5α能生长
度质粒DNA的提取。 用途:分子 克隆、质粒提取和蛋白质表达。 pcDB好像是个真核表达质粒 。转哪个无所谓。推荐用DH5α,生长的快一些,质粒稳定一些。
Prepare:200ml LB in a 1L flask1L sterile ddH2O and place in cold room4 50ml conicals chilled on ice10% glycerol (cold)Chilled boxes of 100μl and 1ml pipet tips.Chilled 0.5ml tubes.GeneralThis protocol is for generating enough cells for 10-20










