肺炎链球菌核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

肺炎链球菌核酸检测试剂盒（荧光PCR法）客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
    10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM）   
              2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
  1 μl      加ddH2O至 50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
Human Protein Carbonyl,PC ELISA Kit   人羰基化蛋白     96T
human phospho-inhibitory subunit of NF-KapB Alpha,pIKB Alpha ELISA kit  人磷酸化核因子κB抑制蛋白α（IKKα human ELISA kit）     96T
Human paxillin,Pax ELISA Kit  人桩蛋白     96T
Human small breast epithelial mucin,SBEM ELISA Kit  人小乳腺表皮粘蛋白     96T
human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12,LOC382344 ELISA kit   人类似60S核糖体蛋白L21     96T
human orosomucoid 2,ORM2 ELISA Kit  人类粘蛋白2     96T
human MAX dimerization protein 1,mxd1 ELISA Kit  人MAX二聚化蛋白1     96T
human claudin 14,CLDN14 ELISA Kit  人水闸蛋白14     96T
human lectin-galactose binding-soluble 3,Lgals3 ELISA Kit  人可溶性半乳糖苷结合凝集素3     96T
human major vault protein,MVP ELISA Kit  人主要穹窿蛋白     96T
human ubiquitin D,UBD ELISA Kit  人泛素蛋白D     96T
human toll-like receptor 2,TLR2 ELISA Kit  人toll样受体2     96T
human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,HFE2 ELISA Kit  年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2     96T
human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit  人卷曲蛋白8     96T
human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit  人蜗牛同源物2     96T
Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit  人高尔基蛋白73     96T
Human TU3A Protein ELISA Kit  人TU3A蛋白     96T
Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit  人电子转移黄素蛋白β肽     96T
肺炎链球菌核酸检测试剂盒（荧光PCR法）Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit  人皮肤蛋白     96T
Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit  人可溶性蛋白185     96T
Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit   人降解加速因子     96T
Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit  人T细胞活化连接蛋白     96T
Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit  人SH2携带蛋白     96T
Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit  人B细胞连接蛋白     96T
Human urease related protein C,UreC ELISA Kit  人尿素酶相关蛋白C     96T
Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit  人衔接蛋白酶活化因子1     96T
Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit  人锚蛋白B     96T
Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit  人潜伏膜蛋白1     96T
Human recombination activating gene 2,RAG-2 ELISA Kit  人重组激活基因2     96T
Human recombination activating gene 1,RAG-1 ELISA Kit  人重组激活基因1     96T
Human NOD-like receptor9,NLR ELISA Kit  人NOD样受体     96T
Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit  人视黄酸诱导基因/RIG-1样受体     96T
Human scavenger receptor B,SRB ELISA Kit  人清道夫受体B     96T
Human cecropin B,CecB ELISA Kit  人杀菌肽B     96T
Human Attacin,Att ELISA Kit  人抗菌肽     96T
Human granulysin,GNLY ELISA Kit  人颗粒溶素     96T
Human histatin 5,HTN5 ELISA Kit  人富组蛋白     96T
Human Ig-like transcripts Receptor,ILTsR ELISA Kit  人免疫球蛋白样转录体受体     96T
Human filamentous hemagglutinin,FHA ELISA Kit  人丝狀血球凝集素     96T
Human cytovillin/ezrin,CVL ELISA Kit  人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白     96T
Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit  人嗜环蛋白/亲环素A     96T产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强

实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的： 1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。 2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性定量方法，已得到全世界的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。 b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。