MelM-2黑色素细胞培养基-2(不含TPA)500 ml
FM成纤维细胞培养基500 ml
FM-2成纤维细胞培养基-2(用于心肌成纤维细胞)500 ml
AEpiCM肺泡上皮细胞培养基500 ml
SkMCM骨骼肌细胞培养基500 ml
EpiCM上皮细胞培养基500 ml
EpiCM-a动物上皮细胞培养基500 ml
MCM肾系膜细胞培养基500 ml
ObM成骨细胞培养基500 ml
CM软骨细胞培养基500 ml
SM滑膜细胞培养基500 ml
NPCM髓核细胞培养基500 ml
HM肝细胞培养基500 ml
SteCM星形细胞培养基500 ml
CMM心肌细胞培养基500 ml
TM滋养层细胞培养基500 ml
AdM脂肪细胞培养基500 ml
PAM前脂肪细胞培养基500 ml
PADM前脂肪细胞分化培养基500 ml
MSCM间充质干细胞培养基500 ml
MODM间充质干细胞成骨细胞分化培养基500 ml
MADM间充质干细胞脂肪细胞分化培养基500 ml
SMCM-sf平滑肌细胞培养基500 ml
NM神经细胞培养基500 ml
OPCM少突胶质前体细胞培养基500 ml
OsM球状少突细胞培养基500 ml
KM角质细胞培养基500 ml
KM-d角质细胞培养基(特定)500 ml
FM-sf成纤维细胞培养基500 ml
TEpiCM扁桃体上皮细胞培养基500ml
OKM口腔角质细胞培养基500 ml
BEpiCM支气管上皮细胞培养基500 ml
SAEpiCM小气道上皮细胞培养基500 ml
EpiCM-2上皮细胞培养基-2500 ml
莫氏立克次体(RM)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)UCM尿道上皮细胞培养基500 ml
PEpiCM前列腺上皮细胞培养基500 ml
CEpiCM角膜上皮细胞培养基500 ml
OEpiCM卵巢上皮细胞培养基500 ml
MSCM-sf间充质干细胞培养基500 ml
MCDM间充质干细胞软骨细胞分化培养基500 ml使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1.样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
荧光定量PCR原理:
荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。