西尼罗河病毒(WNV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)

西尼罗河病毒(WNV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

CCL1/TCA3/I-309  嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原 0.5mg
CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted)  活化T细胞表达和分泌的调节因子抗原 0.5mg
CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta)  巨噬细胞炎性蛋白1β抗原 0.5mg
MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha)  巨噬细胞炎性蛋白3α抗原 0.5mg
CCL12/M-5(C-C motif chemokine 12)  单核细胞趋化蛋白5抗原 0.5mg
CCL14/HCC-1(C-C motif chemokine 14)  嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗原 0.5mg
西尼罗河病毒(WNV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)ABCD-1/CCL22  嗜酸粒细胞趋化蛋白22抗原 0.2mg
MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta)  巨噬细胞炎性蛋白19抗原 0.5mg
CCL26(Eotaxin 3)  嗜酸粒细胞趋化蛋白3抗原 0.5mg
CCR-1(CC chemokine receptor 1)  细胞表面趋化因子受体1抗原 0.5mg
CCR-3(CC chemokine receptor 3)  CC趋化因子受体3抗原 0.5mg
CCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A)  细胞表面趋化因子受体2A抗原 0.5mg
CCR-4(C-C chemokine receptor 4)  细胞表面趋化因子受体4抗原 0.5mg
CCR-6/CD196 peptide  细胞表面趋化因子受体6抗原 0.5mg
CXCR6(CXC-chemokine receptor 6) peptide  细胞表面趋化因子受体6抗原 0.5mg
CCR-7(CC chemokine receptor 7)  CC趋化因子受体7（多肽） 0.5mg
CXCL10/IP-10  CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗原 0.5mg
VEGF(Vascular endothelial growth factor)  血管内皮生长因子（多肽抗原） 0.5mg
CD10/CALLA (Neutral Endopeptidase)  CD10抗原 0.5mg
ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1)  ZCWCC1抗原 0.5mg
CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor  CD105/转化生长因子β受体抗原 0.5mg
CD138/Syndecan-1  多配体蛋白聚糖1抗原 0.5mg
CD146/MCAM  黑色素瘤细胞粘附分子CD146抗原 0.5mg
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N)  氨肽酶N抗原 0.5mg
CD14(cluster of differentiation antigen 14)  CD14/内毒素受体抗原 0.5mg
CD28  CD28抗原 0.5mg
CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule)  活化白细胞粘附分子抗原 0.5mg
CD177/NB1 peptide  嗜中性粒细胞抗原CD177抗原 0.5mg
CD24  CD24抗原 0.5mg
CD2AP (CD2-associated protein)  白细胞分化抗原CD2AP 0.5mg
CD33 peptide(human)  CD33抗原（人） 0.5mg
CD33/Siglec-3(mouse ret)  CD33抗原(大、小鼠） 0.5mg
CD34  CD34抗原（细胞表面的唾液粘蛋白） 0.5mg
CD38(mouse, rat)  CD38多肽（小鼠、大鼠） 0.5mg
CD38(human)  CD38抗原（人） 0.5mg
CD36  CD36（多肽） 0.5mg
CD7  CD7抗原 0.5mg
CD40L(CD40 Ligand/TNFSF5/CD154)  CD40L抗原 0.5mg
CD44  CD44抗原 (多肽抗原) 0.5mg
Argireline peptide   抗皱寡肽-1/六胜肽-3/阿基瑞林/乙酰六胜肽-3 1g
GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2)  醋酸促生长激素释放肽2 1g
GHRP-6 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 6)  醋酸促生长激素释放肽6 1g
Matrixyl Acetate  五胜肽/美容肽—M肽 1g
MT-II(Melanotan II Acetate)  醋酸美拉诺坦II 1g
Pentapeptide-3/Leuphasyl  五胜肽 1g
PT141(Bremelanotide PT-141)  雌性激素肽 1g
使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1.样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区）
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。
荧光定量PCR原理：
荧光定量PCR最早称TaqMan PCR，后来也叫Real-Time PCR，是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理：随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。而在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系，根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段， PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便，在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念：荧光阈值和 CT值。