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- 2025年07月16日
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文献和实验（纯组织）加800 ul Trizol试剂。 二、DEPC处理方法如下 1. DEPC处理 （1）DEPC水：100 ml超纯水加入0.2 ml DEPC，充分混匀，高压灭菌。 （2） Tip头(枪头）. EP管等在提RNA过程中及做RT时接触RNA的器材（包括1 ml. 200 μl. 20 μl Tip头；EP管和PCR反应管等）：用0.1%的DEPC水（1000 ml超纯水加入1ml DEPC）37 ℃浸泡过夜，高压灭菌。 2. 提取RNA，用DEPC水溶
Chelex-100法提取微量DNA1. Add 1/50 volume of Proteinase K (10 mg/mL) and incubate the sample at 65°C for 2 hrs to overnight.2. 200 uL 5% Chexlex-100,add 10 uL proteinase K (20 mg/mL),inculate 2 hrs in 37 °C.3. 50ul Chelex液及lfl蛋白酶K水，56％温水浴消化2h后，煮沸8min，迅速放
细胞（BK或BT），用Earle’s液洗一次后，按原培养液1／10的量接毒。置37℃温箱吸附1h，然后加入pH7.1～7.2含青、链霉素200g/μgml的LE液至原培养液量，37℃培养，待80%～90％出现典型IBR病变时收获培养物，冻融2次后，3 000r/min离心10min，其上清即为病毒抗原。测定病毒滴度（TCID）并分装小瓶，贮于-70℃备用。半年内滴度保持不变。 3．病毒滴度测定 将制备的病毒抗原，用pH7.0～7.2的LE液作10倍递增稀释至10-7，每病毒稀释滴度液接种
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