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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3~12个月
- 英文名:
pCDNA3.1-FLAG-ASFV-C315R(pig)(1-651bp)
- 库存:
大量
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
| 启动子 | CMV |
| 复制子 | pUC |
| 克隆菌株 | DH5a |
| 培养条件 | 37度 |
| 载体宿主 | 哺乳细胞 |
| 载体用途 | 蛋白表达 |
| 基因种属 | 猪 |
| 基因类型 | ORF |
| 原核抗性 | Amp |
| pCDNA3.1-FLAG-ASFV-C315R(pig)(1-651bp) |
| pCDNA3.1-FLAG-ASFV-C315R(pig)(331-948bp) |
| pEnCMV-NFKBIZ(mouse)-3×FLAG-SV40-Neo |
| p3×FLAG-CMV-ASFV-F317L(pig)(325-954bp) |
| pCMV-SIGLECE(mouse)-SV40-Neo(1同义突变) |
| pEnCMV-TOMM20(mouse)-3×FLAG-SV40-Neo |
| pECMV-DSCAM(mouse)(1-4773bp)-Myc-FLAG-SV40-Neo |
| pCMV-TOMM20(human)-Linker-EGFP-SV40-Neo |
| pCDNA3.1-3×Myc-CDKN2A(human)-5-SV40-Neo |
| pEnCMV-POLDIP2(mouse)-3×FLAG-SV40-Neo(2同义突变) |
| pEnCMV-EPB41(human)-Myc-FLAG-SV40-Neo |
| pCDNA3.1-FOXO1(human)-3×HA-SV40-Neo |
| pCI-neo-CMV-mCherry-Linker-TERT(human) |
| pCI-neo-CMV-EGFP-Linker-TERT(human) |
| mARG1 cassette 2 |
质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 收到质粒干粉后请先短暂离心,再加入20ul ddH2O 溶解质粒,然后转化进相应的感受态中,再挑取单菌落提取质粒(提供图谱 序列 测序报告 售后)暂时不使用可先放置于-20℃保存,TE缓冲液中-80℃的DNA更佳
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文献和实验3.0载体、pCDNA3.1 myc his C载体和pEGFP载体) .0的MCS两端有T7和SP6 如果我用T7和SP6作为引物,则 1.P出大小约150bp的片段,则为MCS序列,无插入片段 2,若有插入片段,则应该为目的大小+152bp 如下图所示: 后再改进为T7+目的基因下游引物(目的基因-R),或者目的基因上游引物(目的基因-F)+SP
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增,得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小,然后通过胶回收,获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基,回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒:将原始的质粒载体,比如 pcDNA3.1 质粒,选择合适的酶切位点,比如 NheI/KpnI 进行酶切,获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul,试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时,或适当延长时间,保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增,得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小,然后通过胶回收,获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基,回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒:将原始的质粒载体,比如 pcDNA3.1 质粒,选择合适的酶切位点,比如 NheI/KpnI 进行酶切,获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul,试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时,或适当延长时间,保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
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