- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-753710y
- 中国
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Yeast PCR Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Yeast PCR Kit
酵母菌（Yeast）的用途广泛，与人类关系十分密切，在酿造、食品、医药工业等方面占有重要地位。某些酵母菌可引起人和动植物的病害，如白假丝酵母菌可引起皮肤、黏膜、呼吸道、消化道等多种疾病。酵母菌也有质粒存在，这种 2μm 长的质粒称为 2μm 质粒，约 6300bp。这种质粒至少有一段时间存在于细胞核内染色体以外，利用 2μm 质粒和大肠杆菌中的质粒可以构建成能穿梭于细菌与酵母菌细胞之间的穿梭质粒。因此快速灵敏检测酵母菌属具有重要意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增Yeast 酵母菌属，与其他微生物没
有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL（亮黄色） |
| Yeast酵母菌属通用PCR 引物混合液 | 13-53710yw | 100 μL（白盖） |
| Yeast酵母菌属通用PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 60908-53710pc | 50 μL（黄盖） |
| 天净沙核酸释放剂（试用装） | 61202 | 20 次（1mL、绿盖） |
| 使用手册 | 13-53710sc | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次天净沙核酸释放剂试用装，其使用 手册可以从本公司网站天净沙核酸释放剂或产品编号 61202 下载。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和 一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要 求的样品起始量）中加 10μL 酵母菌属通用 PCR 阳性对照的 1 万倍稀释 液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| Yeast酵母菌属通用PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（Yeast酵母菌属通用PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 30sec |
| 50℃ | 30sec | |
| 72℃ | 25sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物 448bp，阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否 则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以 排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验的；后者分子量约为 80 × 106Da ，它与 F 因子相似，具有通过接合作用转移的功能，属严紧型控制，只有 1~2 个拷贝。凡带 Col 因子的菌株，由于质粒本身编码一种免疫蛋白，从而对大肠杆菌素有免疫作用，不受其伤害。 ColE1 已被广泛研究并应用于重组 DNA 和体外复制系统上。 杀伤性质粒 发现于真菌的酵母菌（ yeast ）和黑粉菌的致死颗粒（ killer
4，0.17 nol/L K2HPO4(该溶液的配置方法是：用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4，完全溶解后，用去离子水定容至 100 ml，在 15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌 20 min 。) LB培养基的配方如下: 胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 5g/L 另外根据经验值用NaOH调节
基因工程抗体(genetically engineered antibody)
。由于受细胞内蛋白质加工、修饰能力的限制，大肠 杆菌不适合表达完整的抗体分子。在表达产物末端加入一个标签序列（ｔａｇ ｓｅｑｕｅｎｃｅ）是一种通用的方法，由此可方便地用ＥＬＩＳＡ 等常规 方法对表达产物定量检测，以及用亲和层析方法予以纯化。标签位点通常置于产物的Ｃ －末端，这样既不 影响抗体的活性，又不影响标签的特异性。常用的标签是由６ 个组氨酸与Ｎｉ２ ＋、Ｚｎ２ ＋及Ｃｏ２ ＋等阳离子组 成的组氨酸串。 酵母（ｙｅａｓｔ）是一类单细胞真核生物，不产生毒素，遗传背景清晰。在表达抗体时具有
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