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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Aethina tumida
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
Aethina tumida
产品简介:
蜂房小甲虫(Aethina tumida)是蜂群的寄生虫。它的成虫和幼虫以蜂子、 蜂蜜和蜂花粉为食,导致幼蜂死亡、蜂蜜发酵及巢脾被破坏。小甲虫加速破坏蜂 巢,使成年蜜蜂逃逸。其损害程度可能取决于气候条件等因素,相比温度和湿度较 低的地区,蜂房小甲虫在较高的温度和高湿度下的危害一般更大。蜂蜜提纯设备 也是蜂房小甲虫潜在的繁殖场所,一旦蜂房小甲虫出现在这种设备中,这种危害 会更严重。从卵发育到成虫,蜂房小甲虫需要 3~12 周,周期长短取决于湿度、温 度和食物供应。成虫飞行时所到之处,所有规模的蜂群都会被侵扰,因此蜂房小 甲虫的快速检测具有重要的意义。本试剂盒根据 PCR 原理开发,它具有下列特 点:
1. 即开即用,用户只需要提供细菌 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增蜂房小甲虫。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。
6. 本产品只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL(亮黄色) |
| 蜂房小甲虫PCR 引物混合液 | 13-68100yw | 100 μL(白盖) |
| 蜂房小甲虫PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 13-68100pc | 50 μL(黄盖) |
| 天净沙核酸释放剂(试用装) | 61202 | 20 次(1mL、绿盖) |
| 使用手册 | 13-68100sc | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL 阳性对照的10000 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作 为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的天净沙核酸释放剂, 本产品的裂解液可以直接作为 PCR 模板,省略了 DNA 提取步骤。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 蜂房小甲虫PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| 样品制备阴性对照(超纯水) | - | 18 μL | - |
| 蜂房小甲虫PCR的 10000 倍稀释液 | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 15 sec |
| 55℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 60 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 109bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩 增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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