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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Dactylogyrus spp.
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
Dactylogyrus spp.
指环虫属指环虫属(Dactylogyrus)是扁形动物门、吸虫纲、单殖亚纲、指 环虫科的一属。本属种类众多,我国在黑龙江流域、山东、湖南、湖北、四 川、云南、贵州、福建、海南岛、两广等地均记录和发现大量虫种,目前已有 近 400 种。其种类之鉴别主要依据中央大钩的形态结构及其量度、联结片与 辅助片的大小形状、交接器的形态及其量度、阴道的结构等等。此属在我国 淡水鱼类的单殖吸虫区系组成中占据重要的地位。本产品是根据 PCR 原理开 发的指环虫属的通用检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增指环虫属。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL(亮黄色) |
| 指环虫属通用PCR 引物混合液 | 13-36700yw | 100 μL(白盖) |
| 指环虫属通用PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 60908-36700pc | 50 μL(黄盖) |
| 使用手册 | 13-36700sc | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。可以选用本公司柱式细菌 DNAout,其使用手册可以从本公 司网站搜索产品名称或产品编号 60802-50 下载。 2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 指环虫属通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 指环虫属通用PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照(水) | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照(指环虫属通用PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液) | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30sec |
| 55℃ | 30sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 532bp 的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无 效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验病原 由指环虫属中许多种类引起的种寄生虫性鳃病。我国饲养鱼类中常见的指环虫有鳃片指环虫、鳙指环虫、鲢指环虫和环鳃指坏虫等。虫体扁平,头部前端背面有4个黑色的眼点,口在眼点附近,口下面膨大的部分叫咽,咽后分两根肠管延伸到体后端连接成环状。虫体后端有固着盘, 由1对大锚钩和7对边缘小钩组成,借此固着在鱼的鳃上。指环虫是雌雄同体的卵生吸虫。在虫体的后部有一卵巢,精巢在卵巢的后面。 病症 大量寄生指环虫时,病鱼鳃丝粘液增多,鳃丝全部或部分成苍白色,妨碍鱼的呼吸,有时可见大量虫体挤出鳃外
病原 三代虫属中的一些种类寄生而引起的鱼病。三代虫的外形和运动状况类似于指环虫,主要的区别是:三代的头端仅分成两叶,无眼点;后固着器伞形,其中有一对锚形中央大钩和八对伞形排列的边缘小钩。虫体中部 为角质交配囊,内含1弯曲的大刺和若干小刺。最明显的是虫体中已有子代胚胎,子胚胞中又已孕育有第三代胚胎,称为三代虫。由于三代虫具有胎生的特点,子代产出后,可在原寄生体表寄生,也可移离原寄生侵袭其他寄主。 病症 大量寄生三代虫的鱼体,皮肤上有一层灰白色的粘液
植物附生性生物 epiphyte 是指在其他植物体表面上生长的生物的总称。主要用于水生生物。特别是多指附生藻类,因此也有附生藻类(epiphytic algae)等术语。这种情况在动物则称为叶上动物(phytal animal)。在褐藻类羊栖菜表面上生长的褐藻黑顶藻科(Sphacelariaceae)藻类,在海产种子植物大叶藻(Zostera)等叶表面生长的红藻类无节珊瑚和属(麦杆虫属)(Caprella)等都是这方面的例子一般在其他植物体表面生长的种类[专性附生
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