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HEC-1-A细胞系、HEC-
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充足
上海酶研
人子宫内膜腺癌细胞
人
Human
上皮细胞样
是
顺丰
无限
贴壁
1、细胞传代:1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;3)弃上清,沉淀细胞用1-2ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;2、细胞冻存:1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。 3、细胞复苏:1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;2)将冻存管中的细胞移至含6ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;3)弃上清,沉淀用6ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。公司电话:
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379 人阅读发布时间:2015-04-01 15:18
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