- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-741800
- 中国
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Porcine Endogenous Retrovirus(PERV) Provirus
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Porcine Endogenous Retrovirus(PERV) Provirus
本试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）技术检测，可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因，进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域，不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较，本方法更为快速，特异性更高。
它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增猪内源性逆转录病毒前病毒序列，与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 猪内源性逆转录病毒前病毒PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 猪内源性逆转录病毒前病毒PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是猪内源性逆转录病毒前病毒PCR 阳性对照的1000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 猪内源性逆转录病毒前病毒PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（猪内源性逆转录病毒前病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验佚名 本世纪以来生物学、分子生物学研究证实许多动物和禽类中存在RNA肿瘤病毒，它们或以水平传播方式从一个动物传给另一个动物；或以垂直传播方式传给子代的生殖细胞和体细胞。前者为外源性感染，后者为内源性感染。70年代发现逆转录酶后把RNA肿瘤病毒归为逆转录病毒科(Retroviridae)肿瘤病毒亚科 (Oncovirinae)。在DNA
的转基因微型猪，这些微型猪被设计成人类疾病模型。尽管微型猪仍然是一种有益的医学模式，但对BGI来说，却是另一种有趣的商业机会：该研究所今年早些时候宣布，这些动物也将作为宠物出售。在猪身上的应用仍然是基因组编辑发展议程上的重要议题；而且有一个很好的理由：猪是许多人类疾病的有价值的模型，而且它们的生理学与人类有些相似，它们的器官大小刚好合适——它们仍然是异种移植的最佳候选对象。然而，利用猪器官进行移植的努力长期以来一直受到似乎无法解决的人猪差异的阻碍：危险物种特异性内源性逆转录病毒的存在。不过，就在上个
（minor lymph'ocyte stimulating antigen,Mlsag）。 近年来证明这种内源性MLs抗原是小鼠乳腺肿瘤病毒（mouse mamary umor virus,MMTV）产生的蛋白。MMTV是一种逆转录病毒，以前病毒（provirus）形式整合于小鼠细胞DNA中。这种小鼠可终生制造这种病毒蛋白，因之可视为一种自身超抗原。这种小鼠内源性MLs抗原的化学性质现已证明是一种糖蛋白。 由于MLs抗原的来源已经清楚，故目前称这种小鼠的内源性超抗原为病毒性超抗原。人类
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