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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Equine Rhinopneumonitis Virus(ERV)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
Equine Rhinopneumonitis Virus(ERV)
本试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测,可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因,进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域,不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较,本方法更为快速,特异性更高。
它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增马鼻肺炎病毒序列,与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL(亮黄色) |
| 马鼻肺炎病毒PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL(白盖) |
| 马鼻肺炎病毒PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 试剂四 | 50 μL(黄盖) |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是马鼻肺炎病毒PCR 阳性对照的1000 倍稀释液,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 马鼻肺炎病毒PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照(水) | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照(马鼻肺炎病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。 对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验的分布有一定关系。细胞壁含有明显的内毒素活性,但未发现外毒素。本菌可引起家禽霍乱的暴发性流行,牛的出血性败血病、原发性或继发性肺炎等。国外免疫用的菌苗以加不同佐剂的灭活菌为主,也使用禽霍乱弱毒活菌。中国已于 1959年使用弱毒活苗。 其他几个如嗜肺巴氏杆菌可感染牛、小鼠、兔或人,引起胸膜肺炎;溶血巴氏杆菌可感染牛、羊,引起牛、羊肺炎或败血症;巴氏杆菌可在健康人鼻中发现,偶致臭鼻病。可用磺胺药治疗,抗生素与高度免疫血清合用效果更好。
鼻、鼻咽或咽、喉部急性炎症的总称。多由病毒(埃克病毒、柯萨奇病毒、流感病毒等)引起,部分为细菌(溶血性链球菌最多见,其次为肺炎球菌等)所致。病毒引起的感染,传染性强,可通过含有病毒的飞沫或被污染的用具传播。本病发病率高。全年皆可发病,冬、春季较多。常在气候突变时流行。受凉、淋雨、疲劳、体弱及呼吸道慢性炎症常为诱因。本病起病急,早期症状有喷嚏、鼻塞、流涕、咽部干痒作痛、声音嘶哑或咳嗽。全身症状较轻,成人可不发热或有微热。检查可见鼻粘膜充血、水肿、咽充血及扁桃体肿大。一般 5~
炎 出血性黄疸钩端 螺旋体、犬钩端螺旋体 发烧,呕吐,口腔粘膜齿根出血,腹泻,死亡 肝溶血性黄疸,脾肿胀,出血,肾肿胀,充血,萎缩、肠充血,出血 须发癣菌 犬小饱子菌 脱毛,皮肤湿疹,痂皮 无明显变化 温热病毒 发热,流鼻汁,咳嗽,结膜炎,口腔粘膜炎症,呕吐,腹泻,死亡 支气管肺炎,肠粘膜充血 犬传染性肝炎病毒 发热,呕吐,角膜、结膜炎, 腹泻,口腔粘膜出血斑 肝苍白,点状坏死,肠粘膜肿胀,充血、出血,腹水增加,腹腔出血 鼠弓形体 发烧,咳嗽,腹泻 肺炎 二联等孢子球虫
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