- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-726100
- 中国
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)
本试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）技术检测，可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因，进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域，不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较，本方法更为快速，特异性更高。
它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增青蟹双顺反子病毒序列，与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 青蟹双顺反子病毒PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 青蟹双顺反子病毒PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是青蟹双顺反子病毒PCR 阳性对照的1000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 青蟹双顺反子病毒PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（青蟹双顺反子病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验随着秋季的来临，中国本土甲流病例持续增多，聚集性疫情明显增加，防控工作面临新的严峻形势。现在已进入关键的防控措施落实阶段，其中检测与诊断技术至关重要。实时荧光定量PCR技术在以往禽流感诊断中的应用众所周知，虽然本次人感染猪流感事件的病毒基因序列还在进一步确立当中，但本次疫情病原学基础明确，属于RNA病毒感染性疾病。回顾近年来感染RNA病毒的烈性传染病，如SARS、禽流感，世界卫生组织及我国卫生行政和技术部门相继制定了较为成熟的实验室检测和诊断标准，其中我国颁布的应用实时荧光定量PCR方法进行
感谢您的积极参与！ 银染背景深怎么回事 此引物设计是否合理 RNA 2100bp,ORF框1600bp 如何设计引物 求教长链PCR扩增的问题 哪位有35S启动子和 Nos 终止子的比较成熟的引物序列 求助关于制作和应用PCR诊断试剂盒方面的资料 MSP中醋酸铵用法 MSP不见条带 做病毒的基因的RT－PCR能否用oligo（dt）？ 急需有关基因测序方面的问题和测序仪发展史 多重pcr上下游引物Tm不同，该如何安排反应体系 扩不出目的片段 这个小序列
pSUPEREGFP表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白，目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pIRES2-EGFP pIRES2EGFP 双顺反子表达目的基因和 绿色 荧光蛋白 kan/neo 5.3kb E. coli/mammals pIRES2-ZsGreen1 双顺反子表达目的基因和 绿色 荧光蛋白，目的基因位于C端 kan/neo 5.3kb E. coli/mammals pIRES-hrGFP-1a pDsred1-N1
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