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- 2026年08月21日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海富雨
- 检测范围：
/
- 检测方法：
酶联免疫吸附试验法
- 应用：
检测
- 适应物种：
人
- 标记物：
HRP
- 样本：
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标本
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪（450nm）
- 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
上海富雨生物简介
上海富雨生物科技有限公司（Shanghai Fuyu Biotechnology Co., Ltd)面向国际市场专业研发、生产和销售ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白及相关试剂。产品在免疫学、信号转导、代谢、神经科学等领域内都有最前沿科学文献发表，被国内外多所大学、研究机构和药学平台使用并发表文献多达1000多次。产品主销国外市场，在40多个国家设有代理商，全球合作商达100余个。上海富雨生物科技有限公司凭借优异的产品和完善的服务体系现已受到广大国内外用户的青睐和认可。科研好帮手，专业生产商
品牌优势
1、产品优势：产品具有高特异性、回收率高、线性好、变异系数低、稳定性好；
2、质量保证：产品质量稳定，每批次产品必须通过QA、QC检测才可出库；
3、实力强大： 标准实验室、研发中心，动物房 ；
4、技术支持：技术部5*8小时技术问题及时解答；
5、服务周到：发货及时，三个工作日顺丰快递；售后无忧，包退包换。
研发、生产科研产品：ELISA试剂盒：多种属、1000多种指标：人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、仓鼠、猪、马、鸡、犬、豚鼠、猴、绵羊
抗体：兔多抗、鼠单抗种类丰富，一抗1万余种，二抗100多种；
重组蛋白：多项发明专利，原核表达系统稳定表达蛋白1000余种。
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文献和实验期刊：MODERN ONCOLOGY，Aug．2023，VOL. 31，No. 16
作者：HU Wu1，WEN Yiqiao2，QIN Jialan1，ZHAO Ying3，ZHANG Tianbiao1
DOI：10．3969 /j．issn．1672－4992．2023．16．003
TM4SF1：从抗血管新生到免疫逃逸调控，这个四次跨膜蛋白靶点还有多少惊喜？
（Transmembrane 4 Superfamily）是四次跨膜蛋白超家族，在多数哺乳动物组织和白细胞中均有不同程度的表达。目前，在哺乳动物中有约30多个公认的四次跨膜蛋白超家族成员，包括CD9（MRP1）、CD82（KAI1）、CD63（LAMP-3）、CD81（TAPA1）、CD151（PETA3）、CD37、CD53、C0-029和Sm23等 [2-4]。其中，TM4SF1（L6）与TM4SF家族其它成员相比，虽具有相似的拓扑结构，但缺乏四次跨膜蛋白整体序列的同源性-高度保守的CCG（Cys-Cys-GLy
到细胞外；微囊泡（Microvesicles）直径为 100-1000 nm，以出芽的形式释放到细胞外；凋亡小体（Apoptotic body）直径为 50-2000 nm，由凋亡细胞产生。由于各种胞外囊泡的大小可能有交叉，所以要想通过分离手段得到某种纯化的特定囊泡是很难实现的。 图一 胞外囊泡的分泌 （图片来源于文献） 外泌体携带有细胞来源相关的多种蛋白质、脂类和核酸，其中蛋白质包括跨膜蛋白、信号转导蛋白、细胞支架蛋白、酶等，现在很多文献会选择其中的几种膜蛋白和膜内蛋白作为外泌体的鉴定
1、如何增加外泌体试剂盒的提取效率？ 答：首先，样品准备阶段确保样品的质量和数量充足；在提取阶段，加入 ECS 试剂后可以通过增加静置时间来提高提取效率，但同时也可能影响到纯度，因此静置时间也需要适当控制，初次实验可以考虑静置过夜。 2、离心后无法看到沉淀如何处理？ 答：样品中的外泌体是微量的存在，离心后无法看到沉淀属于正常现象。建议离心后用 PBS重悬沉淀时不仅洗脱肉眼可见的沉淀部位，还要吹洗离心管外侧靠近底部的狭长区域，具体位置根据离心机倾斜角度决定。建议在下次样品准备阶段确保样品的质量
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