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RT
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见标签
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999
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鹿森生物
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1mg
说明
一般描述
IgG抗体亚型是免疫系统中含量最丰富的血清免疫球蛋白。它由B细胞分泌,存在于血液和细胞外液中,可防止细菌、真菌和病毒引起的感染。母体IgG通过胎盘转移到胎儿体内,胎盘对于新生儿的抗感染免疫防御至关重要。[1]
人类骨髓瘤IgG2, κ是通过分级分离、离子交换以及亲和层析流程从人血浆中纯化出来的。
应用
纯化IgG2, κ;可用作免疫球蛋白校准品、参考抗原、封闭剂或包被蛋白,用于各种免疫分析,包括ELISA、点印迹免疫结合、蛋白质免疫印迹、免疫扩散、免疫电泳、血凝反应和细胞结合分析。人骨髓瘤IgG2,κa被用于表征人和小鼠抗体的三硫化物修饰[2] 以及用于流式细胞术。[3]
外形
溶于0.02 M Tris缓冲盐水,pH 8.0。
分析说明
可以通过免疫电泳和间接ELISA法进行鉴定。
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文献和实验1、IgG2a、IgG2b和IgG3结合,同时还结合少量的IgM。洗脱液中的抗体浓度可用紫外光吸收法粗测,小鼠IgG单克隆 抗体溶液在A280nm时,1.44(吸光单位)相当于1mg/ml。经低pH洗脱后在收集管内预置中和液或速加中和液对保持纯化抗体的活性至关重要。 上一篇:单克隆抗体技术:克隆化 下一篇:125I标记单克隆抗体技术
交换层析等步骤达到纯化目的,也有采用较简单的酸沉淀方法。目前最有效的单克隆抗体纯化方法为亲和纯化法,多用葡萄球菌A蛋白或抗小鼠球蛋白抗体与载体(最常用Sepharose)交联,制备亲和层析柱将抗体结合后洗脱,回收率可达90%以上。蛋白可与IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3结合,同时还结合少量的IgM。洗脱液中的抗体浓度可用紫外光吸收法粗测,小鼠IgG单克隆抗体溶液在A280nm时,1.44(吸光单位)相当于1mg/ml。经低pH洗脱后在收集管内预置中和液或速加中和液对保持纯化抗体的活性至关
System(表位标签系统)最重要的是要有高亲和性和高特异性的单克隆抗体和有能够识别的标记(肽)组合。在PA Tag System中有大鼠IgG2a单克隆抗体NZ-1和PA tag(GVAMPGAEDDVV)。但原本NZ-1并不用于亲和标签系统。和现在常用的HA标签系统、Myc标签系统一样,NZ-1本来是为了检测出目的蛋白而使用的抗体(FLAG标签系统是例外,它已经开发出用于亲和标签系统的抗体)2,3,4,5)。而NZ-1原来的标记蛋白是人的平足蛋白,是与血小板凝集相关的单次跨膜型糖蛋白,在恶性肿瘤细胞中会大量
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