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- Sigma
- 进口
- MSQC6-100UG
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 库存：
现货
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
1瓶
应用
SILu™ MAB K1稳定同位素标记通用单克隆抗体已用于掺入多肽样品，分析制备重现性。[1]
特点和优势
通用肽序列定位
FNWYVDGVEVHNAK重链（IgG1）
VVSVLTVLHQDWLNGK 重链（IgG1、IgG3、IgG4）
GFYPSDIAVEWESNGQPENNYK 重链（IgG1、IgG4）
SGTASVVCLLNNFYPR 轻链(κ)
VDNALQSGNSQESVTEQDSK 轻链(κ)
DSTYSLSSTLTLSK 轻链(κ)
SILu™Mab已通过基于MRM的LC-MS/MS分析被验证为复杂生物基质中相关生物治疗药物定量的内标。
SILu™Mab产生0.1 μg/mL至1000 μg/mL的可重复线性曲线，无需对目标样品进行富集或剔除纯化。
在同一目标衍生的多个肽之间观察到良好的一致性。
通过质谱确定标记掺入率>98%。
通过肽图谱确认序列覆盖。
外形
以含有磷酸盐缓冲盐水的冻干粉形式提供
制备说明
SILu™Mab 通用抗体标准品专门优化用作单克隆抗体及Fc融合蛋白药物的定量分析内标。由于与候选抗体在Fc区的通用序列重叠，SILu™Mab具有通用性，从而无需生产候选抗体特异性内标。
利用含有稳定同位素标记氨基酸的富集培养基生产的是13C6、15N4标记的精氨酸和13C6、15N2标记的赖氨酸。
重悬
当使用 0.1％ 的甲酸重悬冻干产品时，SILuMab 的回收率最高。 用其他溶剂重悬可能会降低回收率。重悬后不要冷冻。
程序
将小瓶以约 10,000 x g 的速度短暂离心，在小瓶底部收集产品。
向小瓶中加入500 μL含0.1%甲酸的纯水。
轻轻颠倒样品瓶至少 5 次 混合内容物。
让小瓶在室温下静置至少 15 分钟，然后颠倒重复混匀。
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文献和实验Multiple reaction monitoring targeted LC-MS analysis of potential cell death marker proteins for increased bioprocess control.
Simone Albrecht et al.
Analytical and bioanalytical chemistry, 410(13), 3197-3207 (2018-04-03)
的质粒同时转染，两个质粒都可能整合形成稳定转化子。对于两种不同质粒的共转染，带有目的基因的质粒和带有筛选标记的质粒间的比例为3:1或更高以保证抗性克隆带有转染的目的基因。 10蛋白表达和培养基的选择 哺乳动物细胞系合成可溶的、翻译后修饰的蛋白，比细菌，真菌或昆虫细胞中表达的蛋白更有可能有生物活性。稳定转染的细胞可以合成大量的重组蛋白，而瞬时转染细胞可以快速表达，迅速地合成小量蛋白。普健生物使用细胞系包括CHO，HEK293,CHO-S,CHO-K1等常用细胞系。普健生物提供克隆的HEK
xCELLigence 系统是一种灵敏的、可靠的检测系统，用于持续内源性 GPCR 功能测定。研究中我们对涉及 24 个治疗相关受体家族的一组 43 个配体（参见表 1）进行了测定，并生成了相关GPCR功能图谱。实验涉及通用的肿瘤细胞系、HeLa、U2OS、SH-SY5Y 与 CHO-K1，以及 疾病相关的原代细胞：人血管内皮细胞与混合肾上皮细胞。 = 最大细胞指数值超出缓冲液对照的3倍标准差 = 最小细胞指数值低于缓冲液对照的3倍标准差 表 1：GPCR 功能图概述 材料与方法
的探针比32P标记的探针要稳定，可以在半年内多次重复使用。 对于Southern、Northern和多组织Northern预制杂交膜（MTN）、多组织表达矩阵（MTE）等以尼龙膜为基质的杂交、印迹反应，可以选用SpotLight随机引物标记试剂盒进行标记，和同位素标记一样简单，但却更加安全、容易处理，而且生物素标记的探针稳定时间更长。 配套通用的杂交检测试剂盒里提供特殊配方的SpotHyb杂交液，能有效降低背景，减少非特异杂交，提高灵敏度。HRP偶联的Streptavidin能高效专一地结合
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