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- Sigma
- 进口
- T4174-100ML
- 2025年07月14日
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- 文献和实验
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常温
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现货
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
1瓶
应用
该产品的典型用途是使贴壁细胞从培养表面脱落。使细胞从附着面脱落所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养阶段。
胰蛋白酶-EDTA溶液可用于以下应用：
用作细胞培养物中的补充剂，以维持细胞生长[1]
在收获生长至融合状态的细胞[2]
时，用以使慢病毒转导的巨噬细胞脱落[3]
生化/生理作用
胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C端肽。 如果酸性残基位于切割位点的两侧，则该反应的水解速度减慢，而如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则不水解。 胰蛋白酶活性的最佳pH为7-9。 胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯键和酰胺键。 将EDTA作为螯合剂添加到胰蛋白酶溶液中，可中和掩盖胰蛋白酶作用肽键的钙镁离子。 去除这些离子可增加酶活性。
DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等丝氨酸蛋白酶抑制剂可抑制胰蛋白酶。
组分
胰蛋白酶由含有223个氨基酸残基的单链多肽组成，由胰蛋白酶原在Lys - lle肽键处切去N-端六肽而得。 这些氨基酸序列通过6个二硫键交联。 这就是胰蛋白酶（即β-胰蛋白酶）的天然形式。 BETA-胰蛋白酶可自溶，在Lys-Ser残基裂解，产生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。
注意
本品应置于-10至-40°C环境冷冻储存。避免反复冻融。
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文献和实验Conditional DNA-Protein Interactions Confer Stimulus-Sensing Properties to Biohybrid Materials
Christen, E., H., et al.
Advances in Functional Materials, 21(15), 2861-2867 (2011)
问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用！多谢！答：1、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。如果对贴壁没
2、器材（1）胰脏（2）组织捣碎机（3） 离心机（4）磁力搅拌器（5）透析袋、20目筛网、纱布、水浴锅（6）烧杯、量筒、刻度吸管、 试管 、玻璃漏斗（7）布氏漏斗、抽滤瓶、温度计、滴管、玻璃搅棒、纱布、pH试纸等 ［方法和步骤］ 方法一1、 胰蛋白酶原的提取取新鲜胰脏约150g，剥去结缔组织和脂肪，取净重100g，切成碎块，在组织捣碎机中捣碎，并加入2倍体积预冷的pH2.5～3.0乙酸化水溶液，制成匀浆。浆液倒入500mL烧杯中，用10
外周血是我们流式实验中常用到的样本之一。由于血液离体后会在凝血因子的作用下凝固（图1），采集外周血样本时，需要使用带抗凝剂的采血管，或采集后立即加入抗凝剂。通常，我们流式实验中用到的抗凝剂有两种：EDTA 和肝素。 图1：凝血（左）与抗凝（右）效果展示 1 两种抗凝剂的抗凝原理 EDTA（乙二胺四乙酸）： EDTA 能与血液中的 Ca2＋ 螯合，使 Ca2＋ 失去凝血作用，阻止血液凝固。常用的是钠盐或钾盐。 肝素： 加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶的作用，阻止凝血酶的形成和血
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