Methylamp PCR Enhancer (400 re

An Economic PCR Enhancer for GC-Rich PCR Templates

  Since PCR is often problematic on GC-rich templates, we have evaluated different PCR enhancing additives and generated an Combinatorial Enhancer Solution (CES). We tested this solution on approx. 50 different primer pairs using

菌液PCR的经验

均可以加1-2ul作为模板，需要说明的是PCR的反应是一个微量反应，用于检测10的负3-6次方级别，如果用未做任何处理的 菌落 来做PCR其量过于大，菌落通常都是10的6次方级别（因为我看到最近有一帖是一位仁兄直接用菌落做模板，我没有做过验证，但从原理上来说是不推荐的） 6. 退火温度：55-58°C 此步我没有详细的论证，因为我的目的基因我都做过梯度PCR，其退火温度均可以用55°C或者58°C完成 T7，SP6的退火温度400-900bp的产物

RT-PCR 在基因表达检测中的应用

RNA（用 T7RNA 聚合酶体外合成）经一系列稀释，实验结果表明通过 PCR 的方法可 检测出 10 个分子或低于 10 个分子，这是反映其灵敏度的一个实例。用此技术现已从不到 1 个 philadelphia 染色体阳性细胞株 K562 中检测到了白血病特异的 MRNA 的转录子。 因此没必要分离 polyA+RNA，RNA/PCR 法有足够的灵敏度来满足绝大多数实验条件的需要。 将 PCR 缓冲液同时用于反转录酶反应和 PCR 反应，可简化实验步骤。我们发现整个 反应过程皆用 PCR 缓冲