- ￥560 - 960
- 普利莱
- 北京
- P1203-50
- 2025年12月24日
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- 保存条件：
4°保存
- 保质期：
12个月有效
- 英文名：
Mem Preparation Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
北京普利莱
- CAS号：
//
- 规格：
50次/100次
| 规格： | 50次 | 产品价格： | ￥560.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100次 | 产品价格： | ￥960.0 |
细胞膜蛋白提取试剂盒（Mem Preparation Kit） P1203
描述：本试剂盒能够从哺乳动物新鲜或冻存的组织块、贴壁或悬浮细胞中制备细胞膜与胞内质膜组分。其独特的试剂成分与优化的制备方案使胞膜制备过程简单易行，无需特殊设备和超速离心，可在1小时内完成。应用本试剂盒制备的胞膜是细胞膜和细胞器膜如线粒体、内质网及质膜的混合物。制备得到的产物纯度可胜任后续的免疫沉淀、蛋白印迹、2-D gel、酶活性检测和受体分析等实验。
组成： （以下是50次规格用量）
CER (Cytosol Extraction Reagent) 25ml
MER (Membran Extraction Reagent) 2.5ml
Suspension Buffer 10ml
储存：各组分4 oC 有效期12个月
操作步骤：
注意：此破碎细胞步骤为关键环节。要使用1-3ml小容积玻璃匀浆器，须选用间隙严密的研杵，其特征是将研杵插入匀浆器套管后，可提起研杵而套管不会脱落。有效研磨是上下推拉而不是旋转。破碎效果与细胞类型有关，可在相差显微镜下检查，未裂解细胞应小于5%。
注意：与培养细胞特别是贴壁细胞相比，组织块中的细胞在匀浆时较易破碎，因而并非必须选择间隙严密的研杵。如果研杵与套管过于严密，会使组织匀浆困难，可选用研杵与套管稍松的匀浆器，破碎效果与组织细胞类型有关，可在相差显微镜下检查，未裂解细胞应少于5%。
说明：
以下仅列举数篇使用普利莱P1203试剂盒发表的文章供参考。
描述：本试剂盒能够从哺乳动物新鲜或冻存的组织块、贴壁或悬浮细胞中制备细胞膜与胞内质膜组分。其独特的试剂成分与优化的制备方案使胞膜制备过程简单易行，无需特殊设备和超速离心，可在1小时内完成。应用本试剂盒制备的胞膜是细胞膜和细胞器膜如线粒体、内质网及质膜的混合物。制备得到的产物纯度可胜任后续的免疫沉淀、蛋白印迹、2-D gel、酶活性检测和受体分析等实验。
组成： （以下是50次规格用量）
CER (Cytosol Extraction Reagent) 25ml
MER (Membran Extraction Reagent) 2.5ml
Suspension Buffer 10ml
储存：各组分4 oC 有效期12个月
操作步骤：
- 样本预处理：
- 贴壁细胞：用PBS缓冲液冲洗细胞平皿，用胰蛋白酶消化细胞。800g离心5-10分钟，弃上清，用PBS缓冲液重悬洗涤细胞并再次离心收集细胞。
- 悬浮细胞：800g离心5-10分钟，弃上清。用PBS缓冲液重悬洗涤细胞并再次离心收集细胞。
- 组织细胞匀浆裂解
- 细胞匀浆裂解
注意：此破碎细胞步骤为关键环节。要使用1-3ml小容积玻璃匀浆器，须选用间隙严密的研杵，其特征是将研杵插入匀浆器套管后，可提起研杵而套管不会脱落。有效研磨是上下推拉而不是旋转。破碎效果与细胞类型有关，可在相差显微镜下检查，未裂解细胞应小于5%。
- 组织块匀浆裂解：
注意：与培养细胞特别是贴壁细胞相比，组织块中的细胞在匀浆时较易破碎，因而并非必须选择间隙严密的研杵。如果研杵与套管过于严密，会使组织匀浆困难，可选用研杵与套管稍松的匀浆器，破碎效果与组织细胞类型有关，可在相差显微镜下检查，未裂解细胞应少于5%。
- 粗提物制备：
- 取约500µ裂解物，转移到新的离心管中，800g ,4oC离心5分钟。上清为胞膜-胞浆混合物。
- 胞膜胞浆制备：
说明：
- Suspension Buffer 不含去垢剂，重悬于Suspension Buffer 中的胞膜或胞核组分呈不溶解状态是正常的，用户可用自备溶液重悬胞膜或胞核成分。如果进行蛋白印迹、2-D get等实验，用户可用SDS上样缓冲直接裂解细胞膜或细胞核成分。对于进行免疫共沉淀实验来说，可用RIPA裂解液（C1053）重悬胞膜。
- 试剂盒各组分中未添加蛋白酶抑制剂，可自行选择添加。
以下仅列举数篇使用普利莱P1203试剂盒发表的文章供参考。
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