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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温冷藏
- 保质期：
详见说明书
- 英文名：
Lamp kit for iridovirus of Amur sturgeon
- 库存：
100
- 供应商：
上海一研
- 规格：
50次
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
细胞分裂周期样蛋白20抗体
铁氧化还原蛋白还原酶抗体
磷酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体
甲精结合蛋白17抗体
泛素样核糖体蛋白S30/MNSF-β抗体
F-box蛋白2抗体
F-box蛋白45抗体
法尼基二磷酸合酶抗体
IgG-Fc片断受体转运蛋白α抗体
酰基辅酶A合成酶4抗体
补体因子D抗体
补体因子I轻链抗体
FAHD1蛋白抗体
磷酸化粘着斑激酶抗体
磷酸化粘着斑激酶抗体
下颌发育不良综合征相关蛋白FAKD3抗体
FAM134B蛋白抗体
磷酸化范可尼贫血组蛋白A抗体
范可尼综合征相关蛋白FANCC抗体
FXYD离子转运调节因子6抗体
Fyn结合蛋白抗体
锌指蛋白FYCO1抗体
FYTTD1蛋白抗体
RNA结合蛋白9抗体
岩藻糖转移酶11抗体
干扰素诱导蛋白15抗体
P38相互作用蛋白抗体
钙粘样蛋白28抗体
FA20A抗体
成纤维细胞生长因子18抗体
叉头蛋白O1抗体
纤维母细胞生长因子6抗体
免疫球蛋白A Fc段受体1抗体
脂肪酸延长酶抗体
岩藻糖转移酶2抗体
鸡白痢、鸡伤寒抗体
高首鲟虹彩病毒LAMP试剂盒范可尼贫血相关蛋白F抗体
卵泡抑素抗体
Fas活化的丝/苏氨酸激酶抗体
脆性组氨酸三联体抗体
纤维母细胞表面蛋白抗体
前列腺素E受体4相关蛋白抗体
FLAG Tag标签抗体
成纤维细胞生长因子受体2抗体
成纤维细胞生长因子受体4抗体
凝血酶原酶抗体
衰老关键蛋白抗体
凋亡调节基因之一抗体
凋亡调节基因之一抗体
纤维连接蛋白抗体
FosB蛋白抗体
FRA2/FOSL2抗体
叉头蛋白P3抗体
成纤维细胞生长因子8抗体
肌动蛋白结合蛋白Fascin抗体
线粒体裂变1蛋白抗体
叉头蛋白P1抗体
鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原抗体F1单克隆抗体
纤维母细胞生长因子5抗体
脆性X综合征相关蛋白AFF1抗体
感觉神经蛋白1抗体
线粒体型共济失调蛋白抗体使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500nm，最大发射光谱在 530nm。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验酶 Pfu、KOD、Phanta 等，普通聚合酶 Taq 等。 面对如此之多的选择，大多数刚进实验室的新生们默默表示，选择恐惧症，犯了…… 那么，解决的方法是，根据实验目的选择合适的 DNA 聚合酶。比如：常规的 PCR 扩增和菌液鉴定，长度小于 5kb 的片段，保真度要求不高，使用 Taq 酶扩增即可。选用 Mix 的形式，混样更加简单，操作更加便捷。如果混样泡沫多，想灭掉泡沫的话，推荐大家使用 Green Taq Mix。想要获得较高的产量，可以选择 Taq Plus DNA 聚合酶，相
组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注，短短几年，该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中，在这次甲型H1N1流感事件中，日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广，LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中，并得到了欧美国家的认同。LAMP方法的优势除了高特异性、高灵敏度外，操作十分简单，对仪器设备要求低，一台水浴锅或恒温箱就能实现反应，结果的检测也很简单，不需要像PCR
做LAMP实验有一年多的时间了，其间共做了3个关于LAMP的课题，目前为止基本没有污染~尤其是自己的毕业论文，用完了500uL的 FIP，全部开盖跑电涌，没有一次污染。今天为止做完了所有毕业实验，坐下来总结一下自己的心得~~我只是个小硕士生~~所以都是在浅显的方面叙述，希望大家不要鄙视~~首先感谢一下LAMP交流群，没有这么多老师和同伴在，我不可能顺利毕业。比较可惜的是群里现在人满了。下面开始正文~~1. 引物我一共用过8组引物，所有课题加起来。primerexplorer的引物有效性最高
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