鸡贫血病毒LAMP试剂盒

鸡贫血病毒LAMP试剂盒运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

FoxP1  叉头蛋白P1抗体     0.2ml
FOXM1/HFH 11  叉头蛋白M1抗体     0.2ml
LIMS1  整合素和生长因子样蛋白1抗体     0.1ml
FoxP3  叉头蛋白P3抗体     0.1ml
FOXO1  叉头蛋白O1抗体     0.1ml
Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)  磷酸化叉头蛋白家族抗体     0.1ml
Phospho-FoxO1 (Ser319)  磷酸化叉头蛋白家族1抗体     0.1ml
Phospho-FoxO1 (Ser256)  磷酸化叉头蛋白家族1抗体     0.1ml
FOXO3A  叉头蛋白O3A抗体     0.2ml
Phospho-FoxO3a (Ser318/321)  磷酸化叉头蛋白3A抗体     0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser294)  磷酸化叉头蛋白3A抗体     0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser253)  磷酸化叉头蛋白3A抗体     0.1ml
FOXO4  叉头蛋白O4抗体     0.2ml
Phospho-FoxO4 (Ser193)  磷酸化叉头蛋白4抗体     0.1ml
phospho-FOXO4 (Ser197)  磷酸化叉头蛋白4抗体     0.1ml
phospho-FOXO4 (Ser262)  磷酸化叉头蛋白4抗体     0.1ml
FPRL1/RFP/Lipoxin A4 receptor  脂氧素受体1抗体     0.1ml
Measles virus fusion protein  麻疹病毒融合蛋白抗体     0.2ml
POMT1  蛋白甘露糖基转移酶1抗体     0.2ml
RALA  Ras样蛋白A抗体     0.2ml
TBX2/T-box2  血栓素B2抗体(一种新发现的抑癌基因)     0.2ml
FSH receptor  促卵泡刺激素受体抗体     0.1ml
Follistatin  卵泡抑素抗体     0.1ml
FSP/Spastin  纤维母细胞表面蛋白抗体     0.1ml
FSH/FSHB  促卵泡刺激素抗体     0.1ml
FHIT  脆性组氨酸三联体抗体     0.1ml
Phospho-FHIT (Tyr114)  磷酸化脆性组氨酸三联体抗体     0.1ml
Glucose 6 phosphatase alpha  葡萄糖6磷酸酶α抗体     0.2ml
G6PD/Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase  葡萄糖-6磷酸脱氢酶抗体     0.1ml
G protein beta subunit GI  G蛋白/鸟苷酸结合蛋白抗体     0.2ml
RASA3  Ras-GTP酶激活蛋白3抗体     0.2ml
G protein beta 1/GNB1  G蛋白β1抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基1     0.2ml
G protein beta 2/GNB2  G蛋白β2抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基2     0.2ml
鸡贫血病毒LAMP试剂盒G protein beta 3/GNB3  G蛋白β3抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基3     0.2ml
G protein beta 4/GNB4  G蛋白β4抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基4     0.2ml使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500nm，最大发射光谱在 530nm。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。