鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒

产品名称：鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Yersinia pestis
编号：BJR3061
分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品仅供科研使用服务流程：
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）

规格及成分：
成 分 编 号 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT（末端转移酶） 120312 10 μL
2×TdT Buffer（含 dATP） 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0（含染料） 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1 份
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

特点优势：
    1.   产品仅用于科研特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
    5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR反应五要素： 
鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果：将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
ACVR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 衣康酸(>98%,BR)Itaconic acid质量规格：>98%,BR
肝动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)哲纳尔氏染色素Jenner's stain质量规格：BS
Hurt-78细胞，人T细胞瘤 小鼠胚胎成纤维细胞,3T3-swiss albino细胞 人肺泡上皮细胞cDNAHPAEpiC cDNA蛋白激酶仰制剂KT5823(>97%(HPLC),BC)KT-5823质量规格：>97%(HPLC),BC
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2L-阿拉伯糖醇(>98%,BR)L(-)-Arabitol质量规格：>98%,BR
COS-1(非洲绿猴SV40转化的肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0174NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3L(-)-二苯甲酰1酸一水(>98%,BR)L-(-)DBTA, Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate质量规格：>98%,BR
LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人细胞裂解液 (阳性对照) 吡哌酸（标准品）Pipemidic acid质量规格：供检查用
豹猫肺成纤维样细胞;LCL3盐酸氟奋乃静（标准品）FLUPHENAZINE HYDROCHLORIDE质量规格：供HPLC法含量测定用
SPC-A1细胞，人肺腺癌细胞 绿猴肾细胞,Vero细胞 CM-M034小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基100mL鸦胆子苦醇(标准品)(+)-Brusatol质量规格：HPLC>98%,标准品
Sf-9(昆虫细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸哌唑嗪（标准品）Prazosin HCl质量规格：含量测定
NHEK.f-c 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)少年，单一来源 500,000cells 原代神经胶质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml7-羟基7-Hydroxycoumarin质量规格：≥97%,BR
小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6] 小鼠胰腺星状细胞完全培养基 100mL3-O-甲基 4-羟基雌二醇质量规格：美国进口3-O-Methyl 4-Hydroxy Estradiol
人间充质干细胞-脐带 Human17α-雌二醇-16,16,17-d3质量规格：美国进口17α-Estradiol-16,16,17-d3
TPST1 Others Human 人 TPST1 人细胞裂解液 (阳性对照) 炔雌醇-2,4,16,16-d4质量规格：美国进口Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4
杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3炔雌醇3-硫酸盐质量规格：美国进口Ethynyl Estradiol 3-Sulfate
BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人细胞裂解液 (阳性对照) 全反式4-酮基视黄酸质量规格：美国进口all-trans 4-Keto Retinoic Acid
鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)探针法荧光定量PCR试剂盒CD7 Others Human 人 CD7 人细胞裂解液 (阳性对照) TBE,5XLIQUIDCONCENTRATE5X TBE 浓缩液超级4LRT
人浸润性导管癌旁皮肤细胞;CCD-1095SkR-(-)-2-录扁桃醋 (R)-(-)-2-Chloromcndqlic ccid 2920-18-
NA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 左氧拂沙星相关物质B Lqvofloxccin Rqlctqd CoMpound B;(S)-9,10,difluro-3-Mqthyl-7-oxo-2,3-dixy7no-7H-pyrido[1,2,3-dq][1,4]bqnzoxczinq-6-ccrboxylic ccid 100986-89-8
CL-0319B16-F10(小鼠皮肤色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2无水录化(III)shēng huà shì jì容量：2～8℃5克
RAW264.7细胞，单核细胞-巨噬细胞 人单核细胞白血病细胞,THP-1细胞 EB病毒转化的人B细胞;KMY0923PH缓冲液　PH3.0(20℃)NA
储存条件：
产品仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。