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- GOY-H12312
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海谷研
- 检测范围：
0~
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
10
- 适应物种：
详见说明书
- 标记物：
详见说明书
- 样本：
mumps virus IgM
- 规格：
48T/96T
仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
TMB显色液(可溶型，ELISA HRP用) 100ml
考马斯亮蓝快速染色液 500ml
考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法) 50次
快速蛋白银染试剂盒 25次
丽春红染色液 100ml
糖蛋白染色试剂盒 10次
BCA蛋白浓度测定试剂盒 50次/500次
Bradford蛋白浓度测定试剂盒 60次/1000次
1.5M Tris pH8.8 100ml/500ml
10%凝胶促凝剂 10×1ml
10×TBST 500 ml
10×Tris-Tricine-SDS缓冲液(干粉型) 500ml
10×阳极缓冲液 多肽电泳用 250ml
1M Tris pH6.8 100ml/500ml
2×Tricine多肽上样缓冲液 10×1ml
30%PAA(19:1) 100ml
30%PAA(29:1) 100ml/500ml
4×Native-PAGE protein loading buffer 10×1ml
4×多肽电泳凝胶缓冲液 100ml
40%PAA(19:1) 100ml
40%PAA(29:1) 100ml
40%PAA(37.5:1) 100ml
人腮腺炎病毒IgM抗体ELISA检测试剂盒49.5％ T 3％C（多肽电泳，浓缩胶用） 100ml/500ml
49.5％ T 6％C（多肽电泳，分离胶用） 100ml/500ml
5×DualColor 蛋白上样缓冲液 双染料 5×1ml
5×MonoClolor 蛋白上样缓冲液 10×1ml
5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液 500ml
5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液（干粉型） 1L(干粉)
8-16%RealPAGE预制胶 盒
RealPAGE plus凝胶快速制备及电泳试剂盒 50次
RealPAGE凝胶蛋白电泳试剂盒 10板胶/50板胶
SDS-PAGE凝胶快速制备及电泳试剂盒 50次
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 50次
剥离硅烷 200ml
超低分子量蛋白电泳试剂盒 10次/
蛋白浓缩试剂盒 50次
胺溶液 10×0.6ml
非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒 50次
碱性蛋白非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒 50次
亲和硅烷 25ml
1×Western半干转转膜液 10×1L（粉末）
1×Western湿转转膜液 10×1L（粉末）
10×RealBlot快速转膜液 500ml
10×碱性蛋白Native PAGE转膜缓冲液 500ml
10×酸性蛋白Native PAGE转膜缓冲液 1升
BCIP/NBT 碱性磷酸酶显色液（预混型） 100ml
RealECL发光液 25ml/100ml/500ml
RIPA裂解液（强） 100 ml
TMB显色液(沉淀型，组化或膜HRP显色用) 100ml
Western二抗稀释液 100ml
样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
需要而未提供的试剂和器材:
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
注意事项:
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算:
以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。
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文献和实验1、实验目的： 采用德国IBL的EB病毒不同抗原的抗体检测试剂盒对不同感染阶段的病人样本进行检测，统计出，不同阶段各种抗体的阳性率。为临床EB病毒的诊断，特别是EB病毒的免疫学诊断提供方法和策略依据。 2、材料与方法 为了确定IBL EBV ELISA试剂盒的临床灵敏度和特异性，我们总共做了242个样品。其中的样品都取自EBV感染的不同阶段。采用德国IBL的EB病毒不同抗原的抗体检测试剂盒的名称和目录号为： （1）BE病毒壳抗原IgM抗体ELISA检测试剂盒（EBV VCA IgM
到固相上。因此如用抗人IgM作为二抗，间接测定IgM抗体，必须先将标本用A蛋白或抗IgG抗体处理，以除去IgG的干扰。在临床检验中测定抗体IgM时多采用捕获包被法。先用抗人IgM抗体包被固相，以捕获血清标本中的IgM（其中包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM）。然后加入抗原，此抗原仅与特异性IgM相结合。继而加酶标记针对抗原的特异性抗体。再与底物作用，呈色即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性感染的早期诊断。甲型肝炎病毒（HAV）抗体的检测模式。类风湿因子（RF）同样能干扰捕获包被
抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig 分五类，即 IgG、IgA、IgM、IgD 和 IgE。与免疫测定有关的 Ig 主要为 IgG 和 IgM。Ig 由两个轻链（L）和两个重链（H）的单体组成。Ig 的轻链是相同的，有 κ（kappa）和 λ（Lambda）两种型别。五类 Ig 的重链结构不同，这决定了它们的抗原性也不同。IgG 和 IgM 的重链分别称为 γ（gamma）链和 μ（mu ）链。 重链和轻链的 N 端的氨基酸排列顺序
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