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宽范围凝胶制备缓冲液
凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸,是蛋白质梯研究中最常用的分离方法。WB实验中梯度凝胶比固定浓度凝胶具有更宽的分离能力。但是梯度凝胶较难制备,费时费力。Nacalai提供的宽范围凝胶制备缓冲液可使固定浓度凝胶具有梯度凝胶的分离能力 , 而且制备简单(只需将其与 溶液混合)。采用此产品制备的凝胶可以使用常规的样品缓冲液与电泳缓冲液,并适合用于标准染色方法,如考马斯亮蓝染色与银染色。
产品特点:
- 简单易用 :宽范围凝胶制备缓冲液是4倍浓度的中性pH缓冲液。它可以代替Laemmli缓冲体系中的Tris-HCL缓冲液制备堆积凝胶和分离凝胶。
- 更宽的分别率:宽范围凝胶制备缓冲液提供了比传统的Laemmli缓冲体系更大的分离范围。
- 增强凝胶强度:增加的凝胶的拉伸强度使得即使是低百分比的凝胶也不易破碎。中性pH缓冲液提高了凝胶的稳定性,保质期更长。
订购信息:
| Product name | Storage | Product No. | PKG Size |
| WIDE RANGE Gel Preparation Buffer(4x) for PAGE | 4℃ | 07831-94 | 250ml |
| Separating Gel Overlay Solution for PAGE |
RT | 09316-94 | 20 ml |
| Stacking Gel Buffer Solution(4x) with Dye for SDS-PAGE( 带色 4x 浓缩胶缓冲液 ) | 4℃ | 09268-34 | 100ml |
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文献和实验分离目标样品,从而成为一种可靠的定量方法。 凝胶定量是通过比较样品中的一个条带的强度与 Ladder 中尺寸相似的条带来估算样品的数量(图 3A)。理想情况下,当使用设计用于定量 ladder 时,应加载不同数量的 ladder 以绘制含量与强度的标准曲线,以进行更精确的定量(图 3B)。另外,用具有高灵敏度和宽动态范围的荧光染料染色核酸可进一步改善凝胶定量。一些凝胶成像仪配备了分析软件,用于对凝胶中样品进行更简单的定量分析,而其他凝胶成像仪则具有用于数据存储的云连通性。 图 3.(A)使用已知量
未染色标准品,10 μL;(2) 大鼠肝裂解液,10 μg;(3) 溶菌酶,6 μg;(4) Bio-Rad® 宽范围标准品,1:50稀释;(5) BSA ,6 μg;(6) MagicMark™ XP标准品;10 μL;(7)人IgG,6 μg;(8)人IgM,6 μg;(9)大肠杆菌裂解液,10 μg;(10) Novex® Sharp未染色标准品,10 μL。 误区:NuPAGE® 凝胶跑得太慢了 事实
凝胶过滤层析原理 凝胶过滤层析是根据分子大小和形状的差异进行分离的一种简单可靠的层析技术。当生物分子通过凝胶过滤填料时,分子量大的生物分子只能通过大的孔径,小分子量的生物分子会经过小的孔径,因此和大分子量的生物分子相比,小分子量的生物分子经过的路程会更长。凝胶过滤层析的全过程只用一种缓冲液即可将不同分子量的生物分子进行分离。 特点 填料主要为惰性(无反应性或吸附性)的球状疏松多孔颗粒,具有均匀的分离范围 目标分子不与介质结合,通常仅需一种缓冲液 缓冲液成分不直接影响分辨率(即峰之间的分离
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