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文献和实验相关实验
其吸光度值。 改良的快速简易法,可获得与 Folin—酚试剂法(即Lowry基本法)相接近的结果。
实验原理 这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色(钼兰和钨兰
ml溴水 数滴开口继续沸腾15min,驱除过量的溴,冷却后溶液呈黄色微带绿色(如仍呈绿色,须重复滴加液体溴步骤)。稀释至1L,过滤,滤液置于棕色瓶保存。使用时用标准NaOH液滴定,以酚酞为指示剂,然后适当稀释(加水约1倍)使最终浓度为1mol/L。另外,如果money没有问题的话,可以直接买Sigma公司的Folin-酚试剂,有点贵。标准曲线的制备⑴ 取标准牛血清白蛋白2.50mg,溶于10ml蒸馏水中,使成250μg/ml。⑵ 按表8-2稀释。表8-2 标准曲线稀释方法成分 试 管 号
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