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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
Agar Medium N(Cetrimide Agar)
- CAS号:
///
- 保质期:
三年
- 供应商:
青岛海博
- 保存条件:
室温
- 规格:
250g
用途:用于绿脓假单胞菌的分离培养。
用法
Suspend 45.3g/liter, add 10ml glycerol / liter, heat to boiling for 1 min with shaking, autoclave ( 15 min at 121℃).Cool to 50℃ and pour into Petri dishes.
称取本品45.3g,加热溶解于1000ml蒸馏水中, 加入甘油10ml,煮沸使混合均匀,分装三角瓶 ,121℃高压灭菌15分钟冷至50℃时,倾入无菌平皿备用。
原理:
1.营养成分:铜绿假单胞菌分解蛋白质能力较强,而发酵糖类能力较低,在培养基组分中明胶胰酶水解物和甘油为铜绿假单胞菌的生长提供碳、氮源、维生素和生长因子。
2.无机盐:氯化镁和硫酸钾可以促进绿脓菌素的产生,并维持渗透压。
3.选择性培养的原理:溴化十六烷基三jia铵(cetrimide)作为一种季铵盐阳离子表面活性剂,通过改变细菌细胞的通透性,使细菌发生自溶或引起菌体蛋白质变性沉淀,导致细菌死亡,有较强的抑菌作用。铜绿假单胞菌对溴化十六烷基三jia铵有一定的耐受性,因此,被用于铜绿假单胞菌的选择培养。
4.颜色:铜绿假单胞菌生长过程中会产生两种水溶性色素:黄色的荧光素和绿色的绿脓菌素,所以在溴化十六烷基三jia铵琼脂平板上菌落呈黄绿色。
琼脂培养基N(溴化十六烷基三jia胺琼脂)(EP)微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置30-35℃需氧培养18-24小时。
注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。



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文献和实验g/mL 无 DNA 酶的 RNA 酶,37 ℃ 温育 1 h,以除去残留的 RNA。6. 重复步骤 4、5。1 g 细胞大约能提取到 2 mg DNA。(二)从植物组织中提取基因组 DNA【实验试剂与器材】1. CTAB 抽提液:2% (w/v) CTAB (十六烷基三甲基溴化铵),100 mM Tris.Cl,pH8.0, 20 mM EDTA,pH8.0,1.4M NaCl2. CTAB/NaCl 溶液:10% CTAB,0.7M NaCl配制方法:在 80 mL 双蒸水中溶解 4.1 g
杆菌 JM107 菌株。 2. 化学试剂和溶液 (1) LB 培养基: NaCl 10g/l 酵母提取物 5g/l 胰蛋白胨 10g/l 氨苄青霉素 50 μ g/ml (培养基灭菌后加入) pH7.0 (2) 70% 乙醇 (-20 ℃)及无水乙醇( -20 ℃) (3) STET 缓冲液( pH8.0 )( 8% 蔗糖, 0.5%Triton, 50mmol/L EDTA,,10mmol/L Tris ) (4) 5%CTAB (十六烷基三甲基溴化氨) (5) 1.2
(20 U/μl)、10×酶切缓冲液。 2. 2%的琼脂糖凝胶、5×TAE、 6×上样缓冲液、DNA Marker、溴化乙啶贮存液(10 mg/ml)(EB)。 3. PCR自动热循环仪、紫外透射仪、微量加样器(20 μl、20 0μl)、枪头(20 μl、20 0μl)及离心管(1 ml、0.5 ml)、容器盒、恒温水浴箱、琼脂糖凝胶电泳装置、烧杯、保鲜膜、封口膜、浮漂、微波炉、250 ml 三角烧瓶、透明胶带、托盘天平、台式高速离心机。 三、实验步骤 1. PCR反应
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